В
качестве специфического субстрата для
холинэстеразы в данном методе используется
бутирилтиохолин. Холинэстераза катализирует
гидролиз бутирилтиохолина с образованием
бутирата и тиохолина. Тиохолин восстанавливает
железо (III) в гексацианоферрате до (II).Снижение
оптической плотности раствора прямо
пропорционально активности холинэстеразы
в пробе.
Состав наборов:
1. Реагент 1.
2 х 50 мл
Фосфатный
буфер (рН = 7,6) 92 ммоль/л
Гексацианоферрат
(III) 2,5 ммоль/л
2. Реагент 2. 1
х 20 мл
Бутирилтиохолин 91
ммоль/л
Проба.
Свежесобранная
сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА) без гемолиза.
Быстро отделить от клеток. Не применяйте
фторид натрия в качестве антикоагулянта,
поскольку он блокирует активность холинэстеразы.
Стабильность холинэстеразы в пробе -
15 дней при хранении 2...8°С.
Условия изменения.
Длина
волны 405 нм
Оптический
путь 1 см
Температура
37°С
Измерение:
кинетическое, реакция с уменьшением оптической
плотности
Ход определения.Перед проведением анализа
реагенты следует прогреть до 37°С. Температура
должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение
всего определения.
Добавить в термостатированную
кювету (мкл) |
Бланк по реагенту |
Опытная проба |
Дистиллированная вода |
20 |
- |
Проба |
- |
20 |
Реагент 1 |
1000 |
1000 |
Перемешать, инкубировать 5 минут при
37°С. |
Реагент 2 |
200 |
200 |
Тщательно
перемешать, инкубировать 90 секунд. Измерить
оптическую плотность бланка по реагенту
и опытной пробы; повторить измерения
точно через 30, 60, 90 секунд. Рассчитать
среднее ДА / 30 сек.
Вычисления.
Расчет
активности холинэстеразы в пробе производится
следующим образом:
Активность
холинэстеразы Е/л (37°С) = (АА/30 среднее
пробы - АА/30 среднее бланка) х 131,6х103
Диапазон изменений.
Диапазон
измерений: 1 60 - 25000 Е/л. Если активность
фермента в пробе превышает 25000 Е/л (если
АА/30 больше 0,190), добавьте к 0,1 мл исходной
пробы 0,9 мл физиологического раствора
и повторите исследование. Полученный
результат умножьте на 1 0 (коэффициент
разведения).
Референтные пределы.
Взрослые (37°С) |
Мужчины |
5100 - 11700 Е/л |
Женщины |
4000 - 12600 Е/л |
У
детей до 6 месяцев активность холинэстеразы
может быть на 40-50% выше, чем у взрослых.
Активность холинэстеразы у молодых женщин
составляет 64-75% от активности взрослых
мужчин. Во время беременности активность
холинэстеразы снижается.
Контроль качества.
Для
проведения контроля качества рекомендуется
использовать контрольные сыворотки с
аттестованными для этого метода значениями
холинэстеразы.
Примечание.
1
. Присутствие в пробе гемоглобина в концентрации
до 5,0 г/л, билирубина в концентрации до
342 мкмоль/л и триглицеридов в концентрации
до 8,6 ммоль/л оказывает незначительное
влияние на результат (интерференция не
более 5%).
2.
Реагенты должны быть прозрачными, не
используйте мутные реагенты.
Определение аминотрансфераз.
В практике большое
значение имеет определение активности
аланин и аспартат трансфераз.
Принцип метода: Аспартат-аминотрансфераза
катализирует реакцию между L-аспартатом
и 2-оксоглутаратом, в результате которой
они превращаются в L-глутамат и оксалацетат.
Определение основано на измерении оптической
плотности гидразонов 2-оксоглутаровой
и пировиноградной кислоты в щелочной
среде. Гидразон пировиноградной кислоты,
возникающей при самопроизвольном декарбоксилировании
оксалацетата, обладает более высокой
оптической плотностью.
Аланин-аминотрансфераза катализирует
реакцию между L-аланином и 2-оксоглутаратом,
в результате которой они превращаются
в L-глутамат и соль пировиноградной кислоты.
Определение основано на измерении оптической
плотности гидразонов 2-оксоглутаровой
и пировиноградной кислоты в щелочной
среде. Гидразон пировиноградной кислоты
обладает более высокой оптической плотностью.
Повышенное содержание кетоновых тел
(в сыворотках больных диабетом) вызывает
завышение активности ферментов ACT и АЛТ.
Гемолиз повышает активность ACT или АЛТ
в сыворотке крови. Снижение результатов
вызывают синтетические моющие средства.
Пределы активности:
АЛТ 5 — 30 Е/л ґ 0,017 или 0,09—0,51 мккат/л;
ACT 7—18 Е/л ґ 0,017 или 0,12—0,31 мккат/л.
Метод определения активности АСТ
Необходимые реактивы:
1. Калия фосфат однозамещенный (КН2РО4).
2. Калия фосфат двузамещенный (К2НРО4 ґ
3Н2О).
3. L-аспарагиновая кислота или L-аспарагиновой
кислоты натриевая соль.
4. Фосфатный буфер 0,1 моль/л, рН 7,4: 0,16 г
однозамещенного фосфата калия и 2,07 г
двузамещенного фосфата калия трехводного
растворяют в 40—160 мл воды, проверяют рН
и доводят водой в мерной колбе до 100 мл.
Стабилен при хранении в холодильнике.
5. Субстратно-буферный раствор 0,25 моль/л
L-аспарагиновой кислоты в 0,1 моль/л фосфатном
буфере рН 7,4: 3,30 г L-аспарагиновой кислоты
(или 3,9 г натриевой соли L-аспарагиновой
кислоты) растворяют в 40—50 мл 0,1 моль/л
фосфатного буфера, проверяют рН и доводят
фосфатным буфером в мерной колбе до 100
мл. Если применяют L-acпaрагиновую кислоту,
то к навеске перед растворением в фосфатном
буфере для установления рН 7,4 добавляют
примерно 20—26 мл 1 моль/л раствора едкого
натра и затем проверяют рН. Стабилен при
хранении в холодильнике в течение месяца.
6. β-никотинамидадениндинуклеотид восстановленный,
динатриевая соль, 15 ммоль/л: 16 мг НАДH ґ
Na2 ґ 4H2O растворяют в 1,5 мл воды. Раствор
стабилен в течение 2 недель при хранении
в темной посуде в холодильнике. Коэффициент
молярного поглощения не ниже 5,6 ґ 102 м2
∙ моль–1 при 340 нм.
7. α-κетоглутаровая кислота, 0,45 моль/л:
0,2 г α-кетоглутаровой кислоты растворяют
в 2,5 мл воды и добавляют 5 моль/л раствора
едкого натра. Если используют динатриевую
соль α-кетоглутаровой кислоты, то 0,26 г
соли растворяют в 3 мл воды, раствор стабилен
в течение 2 недель при хранении в холодильнике.
α-кетоглутаровая кислота не должна содержать
примесей пирувата и малата.
8. Малатдегидрогеназа из сердца свиньи
(L-малат: NAD+ оксидоредуктаза). Суспензия
в 50%-ном растворе глицерина. Специфическая
каталитическая активность выше 17 ммоль/(с∙л).
Примеси: АсАТ < 0,01%, ГлДГ < 0,003%, ЛДГ <
0,01%. Для приготовления рабочего раствора
к 20 мкл суспензии добавляют 5 мл воды.
9. Лактатдегидрогеназа из скелетной мышцы
кролика или свиньи. Суспензия в 50%-ном
растворе глицерина. Специфическая каталитическая
активность выше 8 ммоль/(с•л). Примеси:
АсАТ < 0,01%, ГлДГ < 0,003%, АлАТ < 0,01%. Для
приготовления рабочего раствора к 40 мкл
суспензии добавляют 5 мл воды. Стабилен
в течение 3 месяцев при хранении в холодильнике
в хорошо укупоренной посуде.
10. Натр едкий, 5 моль/л; 1 моль/л.
11. Натрия хлорид, 154 ммоль/л (физиологический
раствор).
Примечание.
Для определения активности АсАТ и АлАТ
по оптическому тесту используют отечественные
реактивы или импортные, например, можно
использовать реактивы фирмы “Reanal”. Все
реактивы готовят на бидистиллированной
воде, хранят при температуре от 0 до +4
°С. Уменьшение стабильности может наступить
за счет роста микроорганизмов. Поэтому
в растворы рекомендуется добавлять несколько
капель хлороформа.
Специальное оборудование: Спектрофотометр с термостатированной
кюветой. Измерение проводят при 340 нм.
Ход определения:
Перед определением температура растворов
и сыворотки должна быть доведена до температуры
измерения. Перед работой можно готовить
смесь реактивов, состоящую из субстратно-буферного
раствора, раствора НАДН, МДГ и ЛДГ в соотношении
60 : 1 : 1 : 1. Определение проводят по следующей
схеме.
Перемешивают и через 60 сек. (лаг-фаза)
измеряют экстинкцию и одновременно включают
секундомер. Точно через 1, 2, 3 мин (или через
более короткие, но равные промежутки
времени) измеряют экстинкцию.
Поправку на холостой опыт проводят по
формуле:
(ΔΕ/Δt)оп – (ΔΕ/Δt)хол = (ΔΕ/Δt)скор.
Скорректированную величину опытной пробы
используют в дальнейших расчетах.
Расчет производят
по формуле: Активность, моль/(с∙м3)
= нмоль/(с∙л) ґ 106 = Vр.с / ε ґ 1∙Vсыв ґ (ΔΕ
/ Δt)скор,
где Vр.с — объем реакционной смеси, мл;
Vсыв — объем сыворотки, мл;
t — время реакции, сек.;
ΔΕ / Δt — изменение экстинкции за 1 сек.;
ε — κоэффициент молярной экстинкции
НАДН в м2 ґ моль–1;
1 — толщина слоя жидкости в кювете в метрах
(1∙102).
Примечание: Определение
активности фермента можно проводить
по микрометоду. Для этого перед работой
готовят смесь реактивов, состоящую из
субстратно-буферного раствора, растворов
НАДН, ЛДГ, МДГ в соотношении 60 : 1 : 1 : 1. Опытная
проба включает смесь реактивов — 0,630
мл, сыворотку — 0,10 мл, α-кетоглутаровую
кислоту — 0,02 мл. Холостую пробу ставят
так же, как опытную, но вместо сыворотки
добавляют 154 ммоль/л раствор хлорида натрия.
Определение проводят по той же схеме,
что и в макрометоде.
Метод определения
активности АЛТ
Необходимые реактивы:
1. Калия фосфат однозамещенный (КН2РО4).
2. Калия фосфат двузамещенный (К2НРО4 ґ
3Н2О).
3. Фосфатный буфер, 0,1 моль/л, рН 7,4: 0,16 г
однозамещенного фосфата калия и 2,07 г
двузамещенного фосфата калия трехводного
растворяют в 40—60 мл воды, проверяют рН
и доводят водой в мерной колбе до 100 мл.
Стабилен при хранении в холодильнике.
4. L-aльфа-аланин.
5. Субстратно-буферный раствор, 0,63 моль/л
L-аланина в 0,1 моль/л фосфатном буфере,
рН 7,4: 5,62 г L-аланина растворяют в 80 мл 0,1
моль/л фосфатного буфера, проверяют рН
и доводят фосфатным буфером в мерной
колбе до 100 мл. Стабилен в течение 2 месяцев
при хранении в холодильнике.
6. β-никотинамидадениндинуклеотид восстановленный,
динатриевая соль, 15 ммоль/л (коэффициент
молярной экстинкции не ниже 5,6 ґ 102 м2 ґ
моль–1 при 340 нм): 16 мг НАДН ґ Na2 4H2O растворяют
в 1,5 мл воды. Раствор стабилен в течение
2 недель при хранении в темной посуде
в холодильнике.
7. Натр едкий, 5 моль/л.
8. α-κетоглутаровая кислота, 0,56 моль/л:
0,245 г α-кетоглутаровой кислоты растворяют
в 2,5 мл воды и добавляют 0,5 мл 5 моль/л раствора
едкого натра. Если используют динатриевую
соль α-кетоглутаровой кислоты, то 0,318
г соли растворяют в 3 мл воды. Раствор
стабилен в течение 2 недель при хранении
в холодильнике.
9. Лактатдегидрогеназа из скелетной мышцы
кролика или свиньи, суспензия в 50% растворе
глицерина. Специфическая каталитическая
активность выше 8 ммоль/(с•л). Примеси:
АсАТ < 0,01%, ГлДГ < 0,003%, АлАТ < 0,01%. Для
приготовления рабочего раствора к 45 мкл
суспензии добавляют 5 мл воды. Стабилен
в течение 3 месяцев при хранении в холодильнике.
10. Натрия хлорид, 154 ммоль/л (физиологический
раствор).
Все реактивы лучше готовить на бидистиллированной
воде.
Специальное оборудование то же, что для
АсАТ.
Ход определения:
Перед определением температура растворов
и сыворотки должна быть доведена до температуры
измерения. Перед работой можно готовить
смесь реактивов, состоящую из субстратно-буферного
раствора, раствора НАДН и ЛДГ в соотношении
60 : 1 : 1. Определение проводят по следующей
схеме (табл. 12).
Перемешивают, через 60 сек. (лаг-фаза) измеряют
экстинкцию и одновременно включают секундомер.
Точно через 1, 2, 3 мин (или через более короткие,
но равные промежутки времени) измеряют
экстинкцию. Измерение опытной и холостой
проб проводят против воды при 340 нм в кювете
с толщиной слоя в 1 см.
Поправку на холостой опыт проводят по
формуле:
(ΔΕ/Δt)оп – (ΔΕ/Δt)хол = (ΔΕ/Δt)скор.
Скорректированную величину опытной пробы
используют в дальнейших расчетах. Расчет
производят по формуле:
активность, моль/(с∙м3) = нмоль/(с∙л) ґ
106 = V/ε ґ 1∙V ґ (ΔΕ/Δt)скор.
Условные обозначения те же, что для определения
АсАТ.
Примечание: Определение
активности фермента можно проводить
по микрометоду. Для этого перед работой
готовят смесь реактивов, состоящую из
субстратно-буферного раствора, растворов
НАДН и ЛДГ в соотношении 60 : 1 : 2. Опытная
проба включает: смесь реактивов — 0,630
мл; сыворотку — 0,10 мл; α-кетоглутаровую
кислоту — 0,02 мл. Определение проводят
по той же схеме, что и в макрометоде.
Клинико-диагностическое
значение.
Значительное повышение активности АЛТ
(в два раза выше нормы и более) развивается
при некрозе печеночных клеток любого
происхождения, тяжелом шоке, правосердечной
недостаточности, острой аноксии, обширной
травме печени, левосердечной недостаточности.
Подъем активности имеет место также при
циррозе печени, механической желтухе,
опухоли печени, обширном инфаркте миокарда,
миокардите, миозите, мышечной дистрофии.
Иногда активность увеличивается при
гемолитической болезни, преэклампсии,
умеренной мышечной травме, жировой печени,
хроническом алкоголизме, тяжелых ожогах,
выраженном панкреатите.
Значительное повышение активности ACT
развивается при гепатитах вирусного
происхождения. Подъем активности имеет
место также при некрозе клеток печени
или их повреждении любой этиологии, включая
холестатическую и обструктивную желтуху,
хронические гепатиты, лекарственное
повреждение печени, алкогольный гепатит
(обычно ACT более АЛТ), вирусные и хронические
гепатиты (АЛТ более ACT в большинстве случаев,
плохой прогноз при ACT более АЛТ); метастазах
в печень и гепатомах, инфекционном мононуклеозе,
некрозе или травме сердечной или скелетной
мышцы, воспалительных заболеваниях скелетной
или сердечной мышцы, после острого инфаркта
миокарда (ACT более АЛТ), тяжелой физической
нагрузке, сердечной недостаточности,
тяжелых ожогах, тепловом ударе, гипотиреозе
(40—90% случаев), обструкции кишечника,
молочнокислом ацидозе, злокачественной
гипотермии, посткомиссуротомном синдроме,
ревматической полимиалгии, тифоидной
лихорадке, большой талассемии, токсическом
шоке.
Определение жирового
обмена.
Осуществляется определением:
1) холестерина в сыворотке крови; 2) фосфолипидов;
3) уровня липопротеидов, а также проб Бурштейна
и β-липопротсинового теста Сомы.
Определенный интерес представляет определение
липопротеидов.
Количественное определение
холестерола в организме человека.
Реактивы: Ледяная уксусная кислота,
концентрированная серная кислота, уксусный
ангидрид, абсолютный этиловый спирт.
Кислотная смесь: в сухую колбу наливают
10 миллилитров ледяной уксусной кислоты
и 50 миллилитров уксусного ангидрида,
затем при постоянном перемешивании и
охлаждении добавляют 10 миллилитров концентрированной
серной кислоты. Смесь должна быть бесцветной
или слегка желтоватой. Хранится в холодильнике
в темной склянке с притертой пробкой.
Калибровочный раствор: 232 миллиграмма
холестерола растворяют в 2-3 миллилитрах
хлороформа и доводят до объема 100 миллилитров
абсолютным этиловым спиртом. Приготовленный
раствор содержит холестерол в концентрации
6 ммоль/литр.
Ход определения: к 2,1 миллилитра кислотной смеси
медленно по стенке пробирки добавляют
0,1 мл плазмы или сыворотки без признаков
гемолиза, перемешивают встряхиванием
и ставят на 20 минут в термостат или водяную
баню при температуре 37°С, затем фотометрируют
в кювете с длиной оптического пути 0,5
сантиметров против реактива при длине
волны 625 нм.
Построение калибровочной
кривой и расчет: К 0,05-0,2 мл калибровочного
раствора добавляют такое количество
кислотной смеси, чтобы общий объем был
2,2 мл, перемешивают и выдерживают 20 минут
при температуре 37°С, так же как и опытные
пробы, а затем фотометрируют. Окраска
калибровочной пробы, в которую взято
0,05 миллилитра калибровочного раствора,
соответствует содержанию холестерина
в плазме 3 ммоль/литр; пробы, в которую
взято 0,1 миллилитра, — содержанию 6 ммоль/литр
и так далее.
Примечания.
1. Попадание воды приводит к помутнению
раствора.
2. Следы гемолиза или желтушность исследуемой
плазмы или сыворотки служат причинами
завышенных результатов.
3. Можно использовать для фотометрии и
кюветы с длиной оптического пути 1 сантиметр,
тогда количество кислотной смеси удваивают,
а количество исследуемого материала
остается прежним.
На основании клинического подхода различают
«идеальную» концентрацию холестерола
(до 160 мг/100 мл, около 4 ммоль/л), нормальную
(160–200 мг/100 мл, 4,00–5,15 ммоль/л), умеренно
повышенную (от 200 до 250 мг/100 мл , 5,15–6,45
ммоль/л) и высокую (гиперхолестеринемию,
ГХС), когда уровень холестерола превышает
250 мг/100 мл (> 6,45 ммоль/л) .
В последнее время по рекомендации ряда
специалистов в оценку уровня холестерола
в крови был внесен ряд изменений: его
стали делить на так называемый «желательный»,
пограничный и высокий.
Принцип метода.
В сильнокислой безводной среде
холестерол взаимодействует со смесью
серной, уксусной кислот и уксусного ангидрида.
В ходе реакции холестерол последовательно
окисляется. При этом каждая стадия реакции
сопровождается образованием производных
холестерола, которые имеют на одну двойную
связь больше.
В результате конечного окисления получается
окрашенное соединение, растворенное
в серной кислоте, концентрация которого
определяется фотометрически. Из-за неустойчивости
окраски соединения время фотометрирования
должно быть точно выдержано.
Реакционная смесь со стандартным раствором
холестерола имеет изумрудный цвет. Однако
пробы сыворотки могут давать зеленый,
голубой, бурый цвета. Это связано с тем,
что в результате образования эндогенного
тепла в реакцию вступают многие компоненты
сыворотки крови.
Нормальный уровень общего холестериола
в крови по методу Илька: 4,65-6,46 ммоль/л
(180-250 миллиграмм/децилитр).
Реакция чувствительна на изменение температуры,
поэтому необходимо особенно соблюдать
охлаждение реакционной смеси после добавки
серной кислоты.
Сыворотка должна быть негемолизированной.
Результаты исследования.
Взято 600 анализов. Изменение холестерола
от 2,7 до 10.0
Допустимая концентрация холестерола
в крови – 48,83% (293)
Меньше нормы – 1% (6)
Больше нормы – 50,17% (301)
Среднее значение – 5,596
Определение содержания
β- и пре- β-липопротеидов
сыворотки крови
по Бурштейну и Самай
Реактивы. Хлорид
кальция, 0,025 М раствор; гепарин, содержащий
1000 единиц в 1 мл.
Оборудование.
Микропипетки; ФЭК.
Материал. Сыворотка
крови.
Метод основан на способности гепарина
образовывать с β- и пре-β-липопротеидами
сыворотки крови комплекс, который под
действием хлорида кальция выпадает в
осадок. Степень помутнения раствора пропорциональна
содержанию этих липопротеидов в сыворотке
крови.
Ход определения. В контрольную и опытную кюветы
ФЭКа с толщиной слоя 0,5 см наливают по
2 мл хлорида кальция. Устанавливают шкалу
прибора на нулевую отметку при 720 нм (красный
светофильтр).
В опытную кювету приливают микропипеткой
0,2 мл сыворотки, несколько раз промывая
пипетку. Отмечают исходное значение экстинкции
(Е1). Затем добавляют
микропипеткой 0,04 мл гепарина, несколько
раз промывая ее, и перемешивают содержимое
кюветы. Ровно через 4 мин (по секундомеру)
вновь измеряют экстинкцию (Е2).
Расчет. Содержание
β- и пре-β-липопротеидов х (г/л) в сыворотке
крови рассчитывают по формуле
х = (Е2 – Е1)11,65 ,
где 11,65 – эмпирический коэффициент пересчета
содержания β- и пре-β-липопротеидов на
г/л.
Заключение.
Печень является одним из наиболее важных
органов, поддерживающих жизнедеятельность
организма, так как биохимические функции,
включающие различные обменные реакции,
протекающие в печени, - основа и связующее
ядро общего метаболизма веществ. Кроме
того, печень выполняет специфические
функции, например, участвует в пищеварении,
секретируя желчь; фильтрует кровь с образованием
конечных продуктов обмена веществ, которые
в дальнейшем выводятся из организма;
частично обеспечивает иммунитет, синтезируя
белки плазмы крови.
В общем все функции печени ведут к поддержанию
гомеостаза и нарушение хотя бы одной
из них может повлечь изменения во всем
организме, это значит, что заболевания
печени влияют на состояние остальных
органов и организма в целом. Поэтому в
этой работе было рассмотрено нормальное
и патологическое состояние печени и были
затронуты основы лабораторной диагностики,
так как знание навыков определения синдромов
поражения печени позволяет в дальнейшем
точно поставить диагноз и определить
причину заболевания, что очень важно
на ранней стадии и дает возможность назначить
соответствующее лечение.
Список литературы.
1. Анохин, П.К. Нейрофизиологическая теория
голода, аппетита и насыщения [Электронный
ресурс] / Анохин П. К., Судаков К.В. – 1971.-
т. 2, № 1. - с. 3. – режим доступа: http://www.curemed.ru/medarticle/articles/14248.htm.
2. Березов, Т.Т. Биологическая химия [Текст]:
учебник / Т. Т. Березов, Б. Ф. Коровкин. –
3-е изд., перераб и доп. – М.: Медицина, 1998.
– 704 с.: ил. – (Учеб. лит. Для студентов
мед вузов). – ISBN 5-225-02709-1.
3. Биохимия [Текст]: учебник для вузов /
под ред. чл.-корр. РАН, проф. Е. С. Северина.
– 2-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. –
748 с.: ил. – (серия «XXI век»). – ISBN 5-9231-0390-7.
4. Клиническая биохимия [Текст] / под ред.
чл. корр. РАН, акад РАМН В. А. Ткачука. –
2-е изд., испр и доп. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004.
– 512 с. – (Классический университетский
учебник). – ISBN 5-9231-0420-2.
5. Марри, Р. Биохимия человека [Текст]: в
2-х томах / Р. Марри, Д. Греннер, П. Мейес,
В. Родуэлл. – пер. с англ. В. В. Борисова,
Е. В. Дайниченко; под ред. Л.М. Гинодмана.
– М.: Мир, 1993. – ил. – ISBN 5-03-001774-7.
6. Никитина, Л.П. Биохимия печени в норме
и при патологии [Текст]: учебное пособие
для преподавателей и студентов медицинских
вузов, врачей, интернов, клинических ординаторов
/ Л.П.Никитина, Н.В.Соловьева,
П.Б.Цидендамбаев. – Чита: ГОУ ЧГМА, 2004.
– 52 с.
7. Николаев, А.Я. Биологическая химия [Текст]
/ А.Я. Николаев. – 4-е изд., перераб. и доп.
– М.: Медицинское информационное агенство.
– 2004. – 556 с.: ил. – ISBN 5-89481-219-4.
ДНЕВНИК-ОТЧЕТ О ВЫПОЛНЕНИИ
ИНДИВИДУАЛЬНОГО ЗАДАНИЯ
(заполняется бакалавром
самостоятельно с отметкой о
выполнении работ