Валидационная оценка методов анализа новокаина в растворе для инъекций

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

ВОЛГОГРАДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ

УНИВЕРСИТЕТ

ПЯТИГОРСКИЙ ФИЛИАЛ

 

 

 

Суровцева Елена

 

студент V курса 2 группы

Валидационная оценка методов анализа новокаина в растворе для инъекций

 

 

 

 

выпускная квалификационная работа

по специальности 060108 «Фармация»

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Пятигорск 2014

 

Выпускная квалификационная работа выполнена на кафедре:

____фармацевтической  химии___________________________

 

 

Научный руководитель:

Гюльбякова Христина Николаевна, преподаватель, кандидат фармацевтических наук

 

Рецензент:

 

 

 

 

 

 

Оценка_________________

 

Дата защиты___  _____20__ г.

 

Протокол № _________

 

Председатель ГАК ___________________

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Содержание

ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………………...5

Глава 1. Общая характеристика новокаина гидрохлорида………………………7

1.1 Общая характеристика производных п-аминобензойной кислоты.

Получение и физические свойства новокаина гидрохлорида…………………7

1.2 Способы идентификации  новокаина гидрохлорида………………………..10

1.3 Способы количественного  определения новокаина гидрохлорида………14

1.4 Фармакологическое действие, применение в медицине и хранение 

лекарственных препаратов новокаина гидрохлорида…………………………17

ОБСУЖДЕНИЕ ОБЗОРА ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………24

ГЛАВА 2. ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИК АНАЛИЗА НОВОКАИНА ГИДРОХЛОРИДА В РАСТВОРЕ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ…………………………..26

2.1 Валидационная оценка методик качественного и количественного

анализа лекарственного средства по показателю «Специфичность»………..27

2.1.1 Установление специфичности  в тестах «Испытание на подлинность»…28

2.1.2 Установление специфичности  в тестах «Количественное определение».29

2.2 Валидационная оценка методик количественного определения

новокаина гидрохлорида по показателю «Прецизионность» ……..………….29

2.2.1 Определение прецизионности методики титриметрического анализа….31

2.2.2 Определение прецизионности методики спектрофотометрического

 анализа…………………………………………………………………………….33

2.3 Валидационная оценка методик количественного определения

новокаина гидрохлорида по показателю «Линейность»………… …………….35

2.3.1 Определение линейности  методики титриметрического анализа……….36

2.3.2 Определение линейности  методики спектрофотометрического

анализа……………………………………………………….……………………38

2.4 Валидационная оценка методик количественного определения

  новокаина гидрохлорида по показателю «Правильность»………… …….......39

2.4.1 Определение правильности  методики титриметрического анализа….41

2.4.2 Определение правильности методики спектрофотометрического

анализа…………………………………………………………………………….43

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2…………………………………………………………47

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ……………………………………………………………....48

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ………………………….…………………………….49

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Длительное время новокаина гидрохлорид (прокаина гидрохлорид) являлся местным анестетиком, применявшимся в хирургической практике. По сравнению с современными местными анестетиками (лидокаином, бупивакаином и др.), прокаин обладает менее сильной анестезирующей активностью. Однако в связи с относительно малой токсичностью, большой терапевтической широтой и дополнительными ценными фармакологическими свойствами, позволяющими использовать его в различных областях медицины, он до сих пор имеет широкое применение.

В медицине прокаина гидрохлорид широко используется для местной анестезии, кроме того, назначают его для лечения блокад. Иногда препарат используют для внутрикостной анестезии, для анестезии слизистых оболочек в оториноларингологии.

Современной фармацевтической промышленностью выпускаются растворы для инъекций, мази и суппозитории, содержащие прокаина гидрохлорид. Однако для применения лекарственных форм в медицинской практике необходимо предложить методики качественного и количественного анализа фармакологически активных компонентов, позволяющие достоверно оценивать его качество.

Количественный анализ пробы вещества или ингредиента лекарственного средства – это экспериментальное определение содержания одного или ряда компонентов физическими или химическими методами. Количественный химический анализ проводят согласно методикам анализа, утвержденным в установленном порядке, посредством прямых или косвенных измерений с использованием объемных методов анализа или физико-химических приборов. Любая аналитическая методика должна быть утверждена в установленном порядке, что подтверждает ее метрологическая аттестация. Для этой цели в фармацевтической практике используют метод валидации, то есть экспериментальное доказательство, что методика пригодна для выполнения поставленных задач.

Цели и задачи исследования. В связи с вышеизложенным  целью настоящего исследования является изучение методов анализа лекарственных средств, содержащих новокаина (прокаина) гидрохлорид;  валидационная оценка методик качественного и количественного анализа парентерального лекарственного средства, содержащего  прокаина гидрохлорид.

Для реализации поставленной  цели необходимо решить следующие задачи:

- изучить литературные  данные и современное состояние  в области анализа прокаина гидрохлорида;

- исследовать возможность  использования химических и физико-химических  методов для идентификации и  количественного определения прокаина гидрохлорида в лекарственном средстве;

- обосновать выбор методик  анализа раствора для инъекций, содержащего прокаина гидрохлорид;

- использовать валидационные характеристики для оценки используемых методов анализа;

- доказать валидность методик идентификации  и количественного определения прокаина гидрохлорида в лекарственном средстве.

Научная новизна и практическая значимость: в результате проведенных исследований предложены методики анализа раствора для инъекций с прокаина гидрохлоридом. Методики характеризуются простотой выполнения, экспрессностью, высокой чувствительностью и позволяют достоверно оценивать качество исследуемого препарата.

 

 

 

 

 

ГЛАВА 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НОВОКАИНА ГИДРОХЛОРИДА

 

1.1 Общая характеристика производных п-аминобензойной кислоты. Получение и физические свойства новокаина гидрохлорида

 

Сложные эфиры п-аминобензойной кислоты применяют в качестве местноанестезирующих средств. Предпосылкой создания этой группы синтетических лекарственных веществ явилась попытка найти аналоги алкалоида кокаина, обладающего местно-анестезирующим эффектом, но вызывающего пристрастие (кокаинизм). В результате исследования химической структуры производных кокаина и их фармакологического действия было установлено, что местно-анестезирующий эффект обусловлен не всей молекулой кокаина, а отдельными ее структурными фрагментами, названными анестезиофорной группой:

 

 

На основе полученных данных было синтезировано и исследовано несколько тысяч соединений, содержащих анестезиофорную группу. Из них наиболее высокую активность проявили производные п-аминобензойной кислоты с общей формулой:

 

К ним относятся бензокаин, новокаина гидрохлорид и тетракаина гидрохлорид.

Новокаина гидрохлорид по химической структуре представляет собой β-диэтиламиноэтилового эфира п-аминобензойной кислоты гидрохлорид[1,2]:

 

Получение новокаина гидрохлорида

Исходным продуктом для синтеза новокаина гидрохлорида служит п-нитробензойная кислота (или ее хлорангидрид). п-Нитробензойную кислоту получают окислением п-нитротолуола хромовой смесью:

 

Далее путем ацилирования этанола с помощью п-нитробензойной кислоты и последующим восстановлением полученного эфира п-нитробензойной кислоты получают бензокаин:

 

Путем последующей переэтерификации бензокаина β-диэтиламиноэтанолом в присутствии алкоголята натрия получают новокаин:

 

Новокаин можно также получить подобно бензокаину при взаимодействии хлорангидрида п-нитробензойной кислоты и β-диэтиламиноэтанола с последующим гидрированием нитрогруппы [1,3].

 

Физические свойства новокаина гидрохлорида

 

Новокаина гидрохлорид по физическим свойствам представляет белый кристаллический порошок, без запаха, горького вкуса, на языке вызывает чувство онемения. Температура плавления 1540 – 1580С. Новокаина гидрохлорид очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе,  практически нерастворим в эфире [1].

 

1.2 Способы идентификации  новокаина гидрохлорида

 

В основе испытаний на подлинность новокаина гидрохлорида лежит наличие у него первичной ароматической аминогруппы, третичной алифатической, способность к гидролизу [1,4,5].

Объективными константами, подтверждающими подлинность новокаина, являются максимум поглощения 0,001% раствора при 290 нм, температура плавления при 154-1580С. Подлинность прокаина гидрохлорида устанавливают по идентичности ИК-спектров, снятых после прессования в таблетках калия бромида в области 4000 – 400 см-1 и прилагаемых к ФС рисунков спектров стандартных образцов [1,4].

К общим химическим методам идентификации прокаина относятся: реакции диазотирования с последующим азосочетанием; образование шиффовых оснований, цвиттер-ионов; образование изонитрила, что обусловлено наличием первичной ароматической аминогруппы; реакция образования гидроксамовых кислот, т.к. прокаин является сложным эфиром; реакции с общеалкалоидными реактивами (пикриновой, фосфорновольфрамовой, фосфорномолибденовой кислотами, реактивами Драгендорфа, Майера и др.); реакции галогенирования [1,6,7].

Взаимодействуя с нитритом натрия в кислой среде, прокаин образует соль диазония:

При добавлении полученной соли диазония к щелочному раствору β-нафтола образуется оранжевый осадок (азокраситель) [1,4]:

 

 

Вступая во взаимодействие с альдегидами, например п-диметиламинобензальдегидом в присутствии концентрированной серной кислоты, появляется оранжевое окрашивание [1,2]: