Иммуноферментные тест-системы: общая характеристика, разработка и использование в практике микробиологических исследований

Учитывая вышеизложенное, чувствительность ИФА может варьировать в весьма широком диапазоне значений. Согласно данным литературы, у разных видов иммуноферментных реакций при выявлении корпускулярных антигенов бактериального происхождения она находится в пределах от 10 тыс. до 1 млн. м.к./мл. Многие отечественные и зарубежные авторы, отмечают, что иммуноферментные тесты в 10-100 раз чувствительнее РНГА и её модификаций и в этом отношении соответствуют радиоиммунологическим методам. При этом продолжительность данного вида исследований может составлять от 20-30 мин до 3-4 ч.

Представлена приблизительная  схема разработки иммуноферментных тест-систем: получение основных биокомпонентов;  разработка условий сорбции и стабилизации белков на твердой фазе;  конъюгирование и стабилизация иммуноферментных конъюгатов;  разработка состава растворов в тест-системе;  получение и стабилизация контролей и калибраторов;  конструирование тест-системы;  оценка диагностических характеристик тест-системы на охарактеризованных панелях;  изучение стабильности при хранении.

Рядом авторов установлена  принципиальная возможность выявления  с помощью ИФА разных видов  токсинов, продуцируемых возбудителями  дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой  гангрены.

Таким образом, согласно анализу данных литературы, иммуноферментные реакции с полным основанием можно отнести к разряду наиболее эффективных иммунологических методов экспрессного выявления микроорганизмов и токсинов.

Можно сделать вывод  о том, что ИФА тест-системы в настоящее время широко используют в практике для диагностики многих инфекционных болезней бактериальной, грибковой этиологии, протозойных инфекций и гельминтозов, но особенно вирусных инфекций, в частности гепатитов А, В, С, D, Е, G, ВИЧ-инфекции, герпесвирусных, ротавирусных, аденовирусных, астровирусных, парвовирусных и других инфекций.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Список используемых источников

1. Медицинская микробиология  / Под ред. В. И. Покровского. 3-е изд., стереотип. – М.: ГЭОТАР- Медиа, 2005.

2. Егоров А. М., Осипов А. П., Дзантиев Б. Б., Гаврилова Е. М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая школа, 1991.

3. Яковлев А.Т., Зыкин  Л.Ф., Рыбкин В.С. Иммуноферментный  анализ в микробиологии. - Саратов, 1990.

4. Ванеева Л.И., Цветкова  Н.В. Иммуноферментный метод, его  настоящее и будущее // Иммунология. – 1980. - №1.-С.13-19.

5. Дзантиев Б.Б., Егоров А.М. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа // Журн. Всесоюзного хим. общества. – 1982. - Т.27, №4.-С.442-449.

6. Канатов Ю.В.  Системы серологических реакций  с сенсибилизированными эритроцитами для обнаружения антигенов и антител.– Саратов, 1974. 
7. Tijssen P., Practice and theory of enzyme immunoassays. 1985, Amsterdam ; New York: Elsevier ; New York, USA : Sole distributors for the USA and Canada, Elsevier Science Pub. Co. 502.

8. Беспамятнов  Г.П., Кротов Ю.А. Предельно допустимые концентрации химических веществ в окружающей среде. – Л.: Химия, 1987.

9. Будников Г.К. Определение  следовых количеств веществ как  проблема современной аналитической  химии / Будников Г.К. // Химия. –  2000. – 28c.

10. Беднова В.Н., Дмитриев А.В., Бабий А.В., Милонова Т.И. Новая тест-система ИФА на сифилис // Вестник дерматологии и венерологии. 1994,- № 4. - С. 51 
11. Воронин Е.С., Петров А.М., Серых М.М., Девришов Д.А. Иммунология. – М.: Колос, 2002. – 408 с. 
12. Тарасишин Л.А. Выявление аденовирусных антигенов с использованием ИФА // Лаб. дело. 1990. - № 7. - С. 66-68 
13. Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Иммуноферментный анализ // Журн. Всесоюз. хим. об-ва им. Д.И.Менделеева. 1982. - Т. 27. - № 4.-С. 82-89. 
14. Коллинз У. П. Новые методы иммуноанализа. – М.: Мир, 1991. – 280 с. 
15. Ахмедова И.Н., Гудратов Н.О., Мамедов М.К., Мирзабекова Т.А. Модификация иммноферметного метода определения иммуноглобулина класса А // Лаб. дело. -1991. № 9. - С. 56-59. 
16. Николаева Л.И. "Титры вирусспецифических антител в разные фазы инфекции вирусом гепатита С".// Дайджест "Вирусные гепатиты", Вектор Бест, 2003. С. 34-37. 
17. Кононенко Г.П. Применение твердофазного конкурентного иммуноферментного анализа для определения фумонизинов группы В / Кононенко Г.П., Буркин А.А., Зотова Е.В., Соболева Н.А. // Прикладная биохимия и микробиология. – 1999. – Т. 35. №2. – С. 206-211. 
18. Вербов В.Н. Принципы твердофазного анализа. // Твердофазный иммуноферментный анализ. Труды института имени Пастера, том 64, 1998. С 3 - 27. 
19. Сахаров В.Л. Методы и средства анализа медико-биологической информации: Учебно-методическое пособие. Таганрог. Изд-во ТРТУ. 2001. с 9-15 
20. Супотницкий М.В. Микроорганизмы, токсины и эпидемии. – М., 2000. – 376 с.  
21. Самуилов В.Д. Иммуноферментный анализ / Самуилов В.Д. // Соросовский журнал, http://www.pereplet.ru/obrazovanie/stsoros/896.html. - 1999. 
22. Тет Тьен Нто, Г.М.Ленхофф, Я.Яклич и др. Иммуноферментный анализ, М., 1998. 
23. Хаитов Р.М., Пинегин В.В., Истрамов Х.И.- Экологическая иммунология;- М.: ВНИРО, 1995. 
24. Хотунцев Ю.Л. Человек, технологии, окружающая среда. – М.: Устойчивый мир, 2001. 
25. Манолов А.Д. Твёрдофазные радиоиммунные методы для количественного экспресс-анализа в микробиологии // Журн. микробиол. – 1985. - №4. – С.100-108. 
26. М.Тертон, Д.Р.Бангхем, К.А.Колкотт и др. Новые методы иммуноанализа, М., 1991.

27. World Health Organization.Global Tuberculosis Control // WHO Report.- Geneva, 2002. 
28. Карпузиди К.С., Акулова М.Ф. Применение ализариновых суспензионных антител для быстрой идентификации и дифференциации возбудителей мелиоидоза и сапа // Диагностика особо опасных инфекций. – Ростов-на-Дону, 1968. – С.48-52. 
29. Иммуноферментный анализ и его применение в инфекционной патологии. Под ред. В.И. Покровского, Е.П. Голубинского. М., 1986. 
30. Овчинников Н.М., Беднова В.Н., Делекторский В.В. Лабораторная диагностика заболеваний, передаваемых половым путем. М:Медицина 1987;303. 
31. Van der Sluis J.J. Laboratoris techniques in diagnosis of syphilis. Geritourin Med 1992;68:413 - 419. 
32. Larsen S.A., Steiner B.M., Rudolph A.N. Laboratory diagnosis and interpretation of tests for syphilis. Clin Microbiol Ref 1995;8:1:1 - 21.