Предварительное и экспертное исследование объектов биологического происхождения

Такие методы как хроматография на бумаге, электропреципитация, иммунологические реакции абсорбции-элюции и другие, широко используются в лабораторной судебно-медицинской экспертизе.

При совпадении крови потерпевшего и подозреваемого по системе АВО возникает необходимость выявления в следах крови с дифференцирующими целями антигенов других изосерологических систем. В этом  направлении проводятся активные научные исследования. Использование упомянутых иммунологических реакций, а также иных высокочувствительных методов создает необходимые предпосылки для определения группоспецифических факторов многих систем – эритроцитарных,  сывороточных, ферментных и даже лейкоцитарных, не применяемых раньше в экспертных целях, в незначительных по выраженности следах крови. Совершенно очевидно, что, чем больше будет выявлено в пятне различных факторов, тем больше будет оснований для исключения (или утверждения) происхождения крови от конкретного лица.

Организм в целом обладает высокой специфичностью. По мнению английских гематологов Сенджера и Рейса при наличии комбинации редко встречающихся специфичностей даже небольшого числа систем, может возникнуть ситуация при которой исследуемая кровь окажется принадлежащей одному лицу из миллиона. Практическая значимость этого факта очевидна.

Все это расширяет пределы судебно-медицинской экспертизы при установлении происхождения крови в следах на вещественных доказательствах от определенного лица, в значительной степени способствует конкретизации и объективизации экспертных выводов по этому вопросу.

Вопросы, разрешаемые в  процессе проведения СМЭ пятен крови, подразделяются на диагностические и идентификационные. К диагностическим вопросам относятся следующие:

а) Определение наличия крови - Имеются ли следы крови на вещественных доказательствах?                                                     

б) Определение видовой принадлежности - Принадлежит кровь человеку или какому-либо животному?                                                          

в) Определение групповой принадлежности крови - Если кровь принадлежит человеку, то какова ее групповая принадлежность?                                         

г) Определение половой принадлежности - Мужчине или женщине принадлежит кровь, выявленная на вещественных доказательствах?                      

д) Определение регионального происхождения крови – Какой орган явился  источником кровотечения?                  

е) Принадлежит кровь взрослому человеку или плоду?

Идентификационным является следующий вопрос:            

Не принадлежит ли кровь, выявленная на вещественном доказательстве, гражданину Петрову И.И.?

Определение наличия крови.

Любое судебно-медицинское исследование следов крови начинается с определения ее наличия. 0  наличии  крови  в   пятне  свидетельствуют форменные  элементы,  а   также  гемоглобин   или  его   производные.  В современных     условиях     обычно     применяют    абсорбционную спектроскопию   с   целью   обнаружения    характерных   спектров производных    гемоглобина    -    гемохромогена   (восстановленного  гематина)  или  гематопорфирина   (в  старых пятнах).  При отсутствии    спектроскопа     производят    микрокристаллические реакции  -  получение   соляно кислого  гемина   (кристаллов  коричневого  цвета  в  виде  косых параллелограммов) или  гемохромогена (красные игольчатые кристаллы). 

Однако существуют вещественные доказательства, исследование которых данным методом провести затруднительно, например, в случае растворения крови в большом количестве жидкости, впитывании ее в почву, попадании на снег и пр. Кроме этого, материал, использованный для спектроскопии, уже не пригоден для дальнейших исследований – определения видовой и групповой принадлежности. Это сужает круг решаемых задач при исследовании микроследов крови. Поэтому, наряду с вышеописанным методом широко используется метод хроматографии, который обладает высокой чувствительностью и специфичностью.

Результаты хроматографического анализа, направленные к выявлению гемоглобина, специфичны для крови. Различные вещества, которые могут имитировать кровь: соки ягод и овощей, вино, чернила, а также секреты, экскреты человека и гной не образуют на хроматограммах пятна, характерного для гемоглобина.

В той же вытяжке из микроследа, одна порция которой служила материалом для установления наличия крови, могут быть открыты некоторые примеси к крови, в частности мочи и пота, нередко содержащиеся на загрязненной одежде. Это важно для предотвращения ошибок при определении групповой принадлежности крови, поскольку выделениям человеческого организма также присущи групповые антигены.

Применение для экстрагирования объектов физиологического раствора хлорида натрия создает возможность использовать малые порции одной и той же вытяжки из микроследа для решения судебно-биологической экспертизой ряда вопросов, возникающих при расследовании и раскрытии преступлений, а именно: для доказывания наличия крови – хроматография; для определения ее видового происхождения – реакция преципитации в одном из принятых вариантов; для выявления антигенов сывороточной системы Gm – метод торможения агглютинации. Исходный материал, т.е. объект из которого была сделана вытяжка, при этом может служить для обнаружения антигенов эритроцитарной системы АВО.

Определение видовой принадлежности крови.

Решение этой диагностической задачи позволяет отдифференцировать принадлежность следов крови человеку или животному. При бытовых убийствах, совершенных в состоянии алкогольного опьянения, орудием убийства или причинения тяжкого вреда здоровью часто бывает нож или топор, которым обычно разделывают мясо. Так же часто приходится решать данную задачу в случаях попытки фальсифицировать пятна  крови человека кровью животного (собаки или кошки).

Например, во время совместного распития спиртных напитков в домовладении гражданина В. между хозяином и гостем – гражданином Т. вспыхнула ссора. В результате ссоры хозяин дома ударил гражданина Т. топором в височную область головы. От полученной раны гр-н Т. скончался и был перенесен убийцей на свой двор. Наличие крови на топоре подозреваемый В. объяснял тем, что в этот день он разделывал тушу барана. Проведенным экспертным исследованием  на топоре были выявлены следы крови человека.

Имеется  также  возможность  определения  видовой  принадлежности крови  и  иных  объектов   животного  происхождения другими  методами:   с помощью  иммунофлюоресценции (метод  флуоресцирующих   антител),  используемой   в  различных  областях биологии  и медицины,  путем эмиссионного спектрального  анализа,  представляющего  особый  интерес  в случаях денатурации белка (например, при  воздействиях высокой  температуры)   и   др.   Широкого   применения   в   экспертной практике  эти методы  пока не  получили, хотя   некоторые  из них, по-видимому, являются перспективными.

Определение групповой принадлежности.

С  целью  установления совпадения (или несовпадения) групповой принадлежности крови в следах с групповой принадлежностью крови подозреваемого или жертвы определяют ее  групповую принадлежность.

Например, в парке был обнаружен труп девушки. Убийство было совершено с целью ограбления, так как у жертвы отсутствовали золотые украшения, а мочки ушей были разорваны. По подозрению в совершенном ограблении и убийстве были задержаны два подростка. На подкладке внутреннего кармана пиджака  одного из них был обнаружен мазок вещества бурого цвета. Проведенная СМЭ в/д установила, что это кровь человека ΙΙ (А)  группы. Подозреваемый утверждал, что это кровь принадлежит ему, так как накануне он поранил палец и мог испачкать свой карман, доставая пачку сигарет. Проведенным исследованием было установлено, что он имеет ΙΙΙ (В )  группу крови. Следовательно, выявленная на пиджаке кровь принадлежать ему не может. Позже подозреваемый сознался, что положил именно в этот карман сорванные с девушки сережки.

Известно, что в крови каждого человека содержатся антигены  эритроцитарных,  лейкоцитарных,  сывороточных   и  ферментных  систем,  передающиеся  по  наследству.  Сочетание антигенов образует в каждой системе группу крови.                 

Наиболее  изучены  и,  прежде  всего,  исследуются эритроцитарные системы,  а из  них -  система АВО.  Кроме антигенов 0 (Н), А и В, содержащихся в  эритроцитах, в  эту систему входят агглютинины  и , находящиеся в сыворотке.   Их различные комбинации образуют четыре группы крови: І (О  ), ІІ (А ), ІІІ (В ), ІΥ (АВ).      

Установление групповой принадлежности крови в пятнах складывается  из   раздельного  выявления   антигенов  (агглютиногенов) и агглютининов.  Антигены  устойчивы  к  внешним воздействиям  и могут  сохраняться   в  кровяных   пятнах  длительное   время.   Агглютинины,  наоборот,   большой  стойкостью не обладают и обнаруживаются не всегда.                         

При  совпадении  групп крови  подозреваемого и потерпевшего  по  системе  АВО   прибегают  к   дифференциации  антигенов  других изосерологических  систем -  эритроцитарных, сывороточных и ферментных.                                                                             

Определение половой принадлежности крови.

Если потерпевший  и  подозреваемый  разного пола,  то исключить  вероятность  происхождения  крови  в  пятнах  на вещественных  доказательствах  от  одного  из  них  можно  путем определения половой принадлежности крови.

Ядра нейтрофильных, эозинофильных и базофильных лейкоцитов состоят из сегментов, число которых варьирует от 1 до 5, реже бывает равно 6. От сегментов ядра у некоторых лейкоцитов, как в мужской, так и в женской крови отходят различной формы выросты. Среди разнообразных выростов на ядрах лейкоцитов женской крови, в отличии от мужской, есть образования, обладающие половой спецификой.

Из следов крови ядра лейкоцитов извлекаются в различном состоянии – неповрежденные, разрушенные и сжатые. На неповрежденных ядрах легко обнаружить «барабанную палочку» и образование типа В, даже если оно представляет собой небольшое выпячивание ядра, но более интенсивно окрашенное. Осложняющими обстоятельствами для идентификации образований, специфических для пола, служат: нарушение целостности ядра из-за обрыва сегментов, в результате чего трудно оценить размер выроста, и большая вариабельность размера выростов за счет различных условий подсыхания крови на предметах-носителях.

Определение регионального происхождения крови.

Иногда  возникает  необходимость  в  определении регионального происхождения крови.  Обычно это  касается менструальной  крови  (например,  при  половых  преступлениях).  В отдельных   случаях  требуется   высказать  суждение   о  возможном носовом  кровотечении,  о  происхождении  крови  из  более глубоких дыхательных  путей  или  легкого,  из   желудка,  прямой  кишки.

Основным методом  исследования  является морфологический или цитологический, предусматривающий   обнаружение в  кровяных следах   клеточных  элементов   определенного  органа  (например, эпителия  слизистой  матки,   влагалища,  дыхательных  путей  и  др.). Исследованию   могут  подвергаться   насыщенные  кровью пятна без примеси  выделений  спермы,  слюны  и  др.   Вопрос  о принадлежности   крови   взрослому   человеку  или   плоду  (новорожденному  ребенку)  возникает  при   расследованиях  уголовных  дел  об  убийстве  новорожденных  детей,  прежде  всего   -  о детоубийстве,   т.   е.   убийстве   новорожденного   ребенка  матерью.   Основанием   для   положительного   ответа   является  обнаружение   в   кровяных   пятнах   свойственного   крови плодов фетального гемоглобина  (HbFe). В  пуповинной   крови  доношенного  плода  содержание  его  составляет  70  - 80%,  к концу первого года жизни ребенка  не превышает  1 -  4%, т.  е. Уровня,  характерного  для  крови  взрослого   человека  (Г.   М.  Корень, 1967; Э. М. Семенчева, 1970).

HbFe  отличается  от  гемоглобина  крови   взрослого  человека   (HbA) физико-химическими,   биохимическими,   иммунологическими  и   др.  свойствами.   В  частности   HbFe  характеризует  высокая  резистентность  к  щелочам,  что  и  используется в качестве   реакции   для   его   выявления   (определение  скорости щелочной   денатурации).   Установлено,   однако,   что  достоверные   результаты   могут  быть   получены  лишь   при  исследовании свежих  пятен  крови  (до  трех  месяцев,  В.  А.   Шевчук,  1972), т. к.  со  временем  количество  фетального  гемоглобина  в  них снижается.         

Метод  изоэлектрофокусирования.

В 1995-1996 гг. в экспертную практику ЭКЦ МВД России внедрены новые методики   определения  групповой  принадлежности  следов  крови с применением метода  изоэлектрофокусирования.  Этим  методом определяют генетический  полиморфизм  различных  белков  крови и делят кровь человека на 6-10 групп по каждой системе.

     Последующая математическая обработка полученных результатов  позволяет  определить  процент  вероятности принадлежности следов крови с места происшествия конкретному лицу.  Метод используется как первичное самостоятельное исследование и как дополнительное исследование к системе АВО, или как исследование предшествующее ДНК-анализу,  в зависимости от обстоятельств дела и возможности эксперта.