Фармакопейный контроль качества андрогенов и эстрогенов

 

 

 

 

4.2. Представители эстрогенных гормонов

Таблица 7 – Сравнительная характеристика методов количественного определения

Вещество	ЛФ	Методика количественного определения
		МФ	JP-2006	EP-2008	BP-2009	USP-24
Этинил-эстрадиол	Субстанция	Спектро-фотомет-рия	Алкалиме-трическоетитрова-ние	—	—	ВЭЖХ
Эстрадиолабензоат	Субстанция	—	ВЭЖХ	Спектро-фотомет-рия	Спектро-фотомет-рия	—

 

Международная фармакопея для количественного определения этинилэстрадиола рекомендует спектрофотометрию, которая проводится следующим образом: около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в достаточном количестве безводного этанола до получения 100 мл и разводят 10,0 мл этого раствора до 50,0 мл тем же растворителем. Измеряют поглощение разведенного раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме 281 нм. Рассчитывают содержание С20Н24О2 в испытуемом веществе путем сравнения со стандартным образцом этинилэстрадиола СО, который исследуют одновременно аналогичным образом. Поглощение раствора стандартного образца в правильно откалиброванном спектрофотометре должно составлять 0,72±0,04 [10]. Японская фармакопея с этой же целью рекомендует алкалиметрическое титрование. Для этого взвешивают около 0,2 г этинилэстрадиола, предварительно высушив и растворив в 40 мл тетрагидрофурана. Добавляют 10 мл раствора нитрата серебра (1:20) и титруют 0,1 моль/л  гидроксидом натрия. Точку эквивалентности определяют потенциометрически. Каждый  мл 0,1 моль / л  гидроксида натрия соответствует 29.64 мг C20H24O2 [11].

 

Количественное определение этинилэстрадиола по фармакопее США проводят с помощью ВЭЖХ. В качестве подвижной фазы используют профильтрованную и дегазированную смесь воды и ацетонитрила (1:1), а в качестве неподвижной – селикагель. Детектируют спектрофотометрически при 280 нм [14].

Для количественного определения эстрадиола бензоата Японская фармакопея рекомендует метод ВЭЖХ. В качестве подвижной фазы используют смесь ацетонитрила и воды (7:3). Неподвижная фаза представлена силикатным гелем. Детектор – ультрафиолетовый фотометр поглощения (длина волны 230 нм) [11]. Количественное содержание эстрадиола бензоата по Европейской и Британской фармакопеям определяют спектрофотометрическим методом. Для этого 25,0 мг исследуемого образца (точная навеска) растворяют в безводном этаноле до получения 250,0 мл раствора. Отмеривают 10,0 мл этого раствора и доводят до 100,0 мл этим же растворителем. Измеряют поглощение разведенного раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при максимуме 231 нм. Рассчитывают содержание C25H28O3 в испытуемом веществе путем сравнения со стандартным образцом эстрадиола бензоата СО, который исследуют одновременно аналогичным образом [12, 13].

 

 

 

 

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

Фармакопейный анализ позволяет установить подлинность лекарственного средства, его чистоту, определить количественное содержание фармакологически активного вещества или ингредиентов, входящих в состав лекарственных форм. И несмотря на то что каждый из этих этапов имеет свою конкретную цель, их нельзя рассматривать изолированно. Они взаимосвязаны и взаимно дополняют друг друга.

На основании анализа данных литературы и сравнительной оценки уровня требований и методик анализа, включенных в нормативные документы и зарубежные фармакопеи на лекарственные средства производных андрогенных и эстрогенных гормонов, установлено, что уровень требований и методы анализа указанной группы препаратов достаточно совершенны и позволяют объективно оценить их качество. На данный момент одним из актуальных методов контроля чистоты лекарственных препаратов является метод ТСХ, отличающийся от хроматофафии на бумаге тем, что процесс, протекающий при перемещении подвижной фазы, происходит на сорбенте, нанесенном тонким слоем на инертную поверхность, чем достигается высокая чувствительность, простота использования и устойчивость к температурным и химическим воздействиям.

Идентификация данной группы лекарственных препаратов проводится как химическими (химические реакции), так и физическими и физико-химическими методами (УФ- и ИК-спектроскопии, ТСХ, ВЭЖХ и др). Физические и физико-химические методы приобретают все большее значение как недеструктивный анализ (без разрушения анализируемого объекта).Эти методы имеют ряд преимуществ перед химическими. Они основаны на использовании как химических, так и физических свойств веществ и в большинстве случаев отличаются экспрессивностью, возможностью унификации и автоматизации.

Количественное определение лекарственных веществ исследуемой группы проводится с помощью ВЭЖХ, спектрофотометрического метода, отличающихся доступностью, простотой методик анализа, экспрессностью, высокой чувствительностью, воспроизводимостью, низкой токсичностью. Значительно реже с этой же целью используется метод алкалиметрического титрования (для количественного определения этинилэстрадиола по JP-2006). Указанный метод не требует дорогого оборудования и дорогих реактивов.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

 

1. Мелентьева, Г.А. Фармацевтическая химия/ Г.А. Мелентьева, Л.А. Антонова. – М.: Медицина, 1985. - 480 с.
2. Библифонд[Электронный ресурс] / Фармацевтическая химия половых гормонов. – Режим доступа:  http://www.bibliofond.ru/view.aspx?id=459951#_Toc288408268. – Дата доступа: 2.05.2013.
3. Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 частях: Ч. 2 Специальная фармацевтическая химия: Учеб.пособие / В.Г. Беликов – 2-е изд. – М.: МЕДпресс-информ, 2008. – 616 с.
4. Халецкий, А.М. Фармацевтическая химия / А.М. Халецкий. – М.: Медицина, 1966. – 763 с.
5. Харкевич, Д.А. Фармакология / Д.А. Харкевич. – М.: ГЭОТАРМЕД, 2001. – 664 с.
6. Машковский М. Д. Лекарственные средства / М. Д. Машковский. – М.: Новая волна, 2005.- 1206 с.
7. Арзамасцев А. П. Фармацевтическая химия / А. П. Арзамасцев.- М.: Гэотар-Медиа, 2006. – 636 с.
8. Солдатенков А. Т. Основы органической химии лекарственных веществ / А. Т. Солдатенков, Н. М. Колядина, И. В. Шендрик. – М.: Химия, 2001.- 189 с.
9. Бышевский, А.Ш. Влияние превращения арахидоновой кислоты в тромбоцитах на эффективность этинилэстрадиола / А.ШБышевский, С.Л. Галян, П.Я. Шаповалов // Тромбоз, гемостаз и реология. – 2007. – т. 34, № 7. – С. 29 – 32.
10. Международная фармакопея 3-е издание / Женева: ВОЗ, 1981. – 604 с., 1983. – 364 с., 1990 – 435 с. 1-3 т.
11. Japanese Pharmacopoeia – 2007, version 15.0 [Электронный ресурс]. – Электрон. текстовые дан. и прогр. (83 Мб). – 1 электрон. опт. диск (CD-ROM) и последующие версии.
12. EuropeanPharmacopoeia – 2002, version 4.0 [Электронный ресурс ]. –электрон. текстовые дон. и прогр. (246 Мб). - 2002. -1 электрон. опт. диск. (CD-ROM).
13. BritishPharmacopeia – 2001, version 5.0 [Электронный ресурс]. – Электрон. текстовые дан. и прогр. (177 Мб). – Norwich, 2001. – 1 электрон. опт. диск (CD-ROM).
14. TheUnitedStatesPharmacopeia, (TheUSP 24thEd.), version 4.2 [Электрон. ресурс]. – Электрон. текстовые дан. и прогр. (245 Мб). Maryland, 2000. – 1 электрон. опт. диск (CD-ROM).
15. Ф. Гейс. Основы тонкослойной хроматографии в 2 т. / Ф. Гейс. Пер. с англ. М.А. Кошевник, Б.П. Лапина/ Под ред. проф. В.Г. Березкина. – М.: Химия, 1999. - 751с.
16. Стыский, Е.Л. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография / Е.Л. Стыский, Л.Б. Ициксон, Е.В. Брауде. –М.: Химия, 1986. -214 с.
17. Кулешова, М.И. Пособие по качественному анализу лекарств / М.И. Кулешова, Л.Н. Гусева, О.К. Сивицкая. – М.: Медицина, 1989. – 288 с.