ДНК эукариот имеет полирепликативное
строение. Скорость полимеризации 50-100
нуклеотидов. Высокая точность обеспечивается
специальными механизмами, которые
осуществляют коррекцию.
Механизмы
коррекции:
- Механизм
самокоррекции – осуществляется ДНК-полимеразой.
Самокоррекция заключается в отщеплении
ошибочно включённого в цепь ДНК нуклеотида,
не спаренного с матрицей. Следствием
самокоррекции снижается механизм ошибок
в 10 раз.
- Эксцизионная
(дореплекативная) репарация – осуществляется
специфическими ферментами. Искажение
последовательностей нуклеотидов в одной
из цепей обнаруживается ими, затем соответствующий
участок удаляется и замещается новым,
синтезированным на второй комплиментарной
цепи ДНК.
- Пострепликативная
репарация – осуществляется путём рекомбинации
(обмена фрагментами) между двумя вновь
образованными двойными спиралями ДНК.
Пример: возникновение тиминовых димеров,
когда они не устраняются самопроизвольно
под действием видимого света (световая
репарация) или в ходе дорепликативной
эксцизионной репарации. Ковалентные
связи, возникающие между рядом стоящими
остатками тимина делают их не способными
к связыванию с комплиментарными нуклеотидами.
В результате во вновь синтезируемой цепи
возникают бреши (разрывы), узнаваемые
ферментами репарации. Восстановление
целостности новой полинуклеотидной цепи
одной из дочерних ДНК осуществляется
благодаря рекомбинации с соответствующей
ей нормальной материнской цепью другой
дочерней ДНК. Образовавшийся в материнской
цепи пробел заполняется путём синтеза
на комплиментарной ей полинуклеотидной
цепи.
Если в наследственном
материале слишком много повреждения
и част из них не ликвидируется, включается
система индуцируемых (побуждаемых)
ферментов репарации (SOS-система). Эти
ферменты заполняют бреши, восстанавливая
целостность синтезируемых полинуклеотидных
цепей без точного соблюдения принципа
комплиментарности. Поэтому иногда сами
процессы репарации могут служить источником
стойких изменений в структуре ДНК (мутаций).
У прокариот большая
часть генома представлена кодирующими
последовательностями генотипа, которые
несут геномную информацию.
У большинства высших
эукариот в организации материала
наблюдается избыточность ДНК. Их геном
представлен:
- Часто
повторяющиеся последовательности –
представлены в гаплоидном наборе 106
и более копиями. Эти последовательности
не участвуют в синтезе РНК и называются
сателитными.
- Умеренно-повторяющиеся
последовательности – представлены 102-105
копиями. В них входят гены, кодирующие
структуру гистоновых белков тРНК и рРНК.
- Уникальные
последовательности – существуют в единственном
числе или в 2-3х копиях. К ним относятся все
гены, кодирующие структуры основных белков.
С них копируются всё мРНК.
№8
Реализация биологической информации
в клетке (транскрипция)
Всю последовательность
процессов, происходящих при синтезе
белковых молекул, можно объединить
в 3 этапа:
- Транскрипция
- Процессинг
- Трансляция
Структурными единицами
наследственной информации являются гены
участки молекулы ДНК, кодирующие синтез
определенного белка.
- Транскрипция
(от лат. transcriptio – переписывание) – процесс
синтеза молекулы и–РНК на молекуле ДНК,
выступающей в роли матрицы. Молекула
ДНК на участке гена раскручивается, и
списывание информации происходит с одной
из двух нитей молекулы ДНК, называемой
кодогенной. Сборку молекулы и–РНК по
принципу комплементарности осуществляет
фермент – РНК–полимераза. Скорость сборки
достигает 50 нуклеотидов в секунду. Списывание
происходит только с части молекулы ДНК,
называемой геном, и длина молекулы и–РНК
в сотни раз короче, чем ДНК. Некоторые
участки и–РНК не несут информацию о будущей
молекуле белка. Их присутствие связано
с особенностями строения генов и механизма
транскрипции. Эти участки молекулы и–РНК,
называемые интронами, необходимо удалить.
- II.
Процессинг – процесс созревания молекулы
информационной РНК, сопровождающийся
удалением интронов, участков, не несущих
информацию о последовательности аминокислот
в синтезируемом белке, и сращиванием
(сплайсингом) остающихся фрагментов (экзонов,
т.е. кодирующих последовательностей).
Поэтому длина созревшей и направляющейся
к рибосомам молекулы и–РНК оказывается
короче первоначальной. Эту РНК называют
матричной (м–РНК).
- III.
Трансляция (от лат. translatio – перевод) –
синтез полипептидных цепей белков по
матрице м–РНК на рибосомах.
Аминокислоты, из которых
синтезируются белки, доставляются
к рибосомам с помощью специальных
транспортных РНК (т–РНК). Молекулы т–РНК,
состоящие из 85–100 нуклеотидов, способны
сворачиваться таким образом, что
напоминают по форме лист клевера. В
клетке присутствует около 40 молекул т–РНК.
На вершине «листа» т–РНК имеется триплет,
называемый антикодоном. Он комплементарен
нуклеотидам кодона м–РНК. К основанию
молекулы т–РНК присоединяется соответствующая
аминокислота, та, которую кодирует триплет,
комплементарный антикодону. Этот процесс
осуществляется с помощью фермента –
кодазы, с затратой энергии, получаемой
при расщеплении молекулы АТФ. Трансляция
состоит из трех последовательных фаз
– инициации, элонгации и терминации.
- Инициация.
На этом этапе происходит сборка всего
комплекса, участвующего в синтезе молекулы
белка. Происходит при присоединенииферментативного
комплекса РНК-полимеразы к промотору,
при этом происходит расплетение двойной
спирали ДНК.
- 2. Элонгация.
В молекуле любой мРНК есть участок, комплементарный
рРНК – малой субъединицы рибосомы и специфически
ею управляемый. Рядом с ним находится
инициирующий стартовый код он АУТ, кодирующий
аминокислоту метионин. На рибосоме имеются
два участка для связывания двух молекул
тРНК. В одном участке, называемым пептидильным,
уже находится первая тРНК. Это всегда
одна и та же тРНК, несущая аминокислоту
метионин (I). С него начинается синтез
любой молекулы белка. Во второй участок
рибосомы — аминоацильный поступает вторая
молекула т–РНК и присоединяется к своему
кодону (II). Между метионином и второй аминокислотой
образуется пептидная связь. Вторая тРНК
перемещается вместе со своим кодоном
мРНК в пептидильный центр. Перемещение
тРНК с полипептидной цепочкой из аминоацильного
участка в пептидильный сопровождается
продвижением рибосомы по м–РНК на шаг,
соответствующий одному кодону. Этот этап
требует затраты энергии. тРНК, доставившая
метионин, возвращается в цитоплазму.
Аминоацильный центр освобождается. В
него поступает новая тРНК, связанная
с аминокислотой, зашифрованной очередным
кодоном (III). Между третьей и второй аминокислотами
образуется пептидная связь, и третья
тРНК вместе с кодоном м—РНК вновь перемещается
в пептидильный центр. Таким образом, в
растущей белковой молекуле аминокислоты
оказываются соединенными в той последовательности,
в которой расположены шифрующие их кодоны
в мРНК. Процесс элонгации, удлинения белковой
цепи, продолжается до тех пор, пока в рибосому
не попадет один из трех кодонов, не кодирующих
аминокислоты. Это триплеты терминации:
УАА, УГА, УАГ. Ни одна из тРНК не может
занять место в аминоацильном центре.
- Терминация
– прекращение роста цепи. Происходит
на специальных участках – терминаторах,
так как гены прокариот состоят из кодирующих
последовательностей, несущих генетическую
информацию ,первичные транскрипты мРНК
могут сразу выполнять роль матрицы при
трансляции. У эукариот транскрипция и
трансляция разделены по времени и топографии.
Гены эукариот содержат
некодирующие последовательности –
интроны. Поэтому первичный транскрипт
имеет большие размеры, чем необходимо
для трансляции и называется ядерной РНК.
Она является точной копией
транскрибированного участка ДНК.
Эта молекула в дальнейшем подвергается
процесингу (формированию зрелых мРНК),
в ходе которой происходит сплайсинг
(вырезание интронов и сшивание экзонов).
В результате формируется мРНК, состоящая
только из кодирующих последовательностей.
Ферментативный
комплекс РНК-полимеразы, принимающий
участие в транскрипции:
- РНК-полимераза-1.
Отвечает за транскрипцию генов рРНК.
- РНК-полимераза-2.
Отвечает за транскрипцию гетерогенной
ядерной РНК.
- РНК-полимераза-3.
Отвечает за синтез рРНК и тРНК.
- РНК-полимераза
митохондрий (и пластид).
№9
Реализация биологической информации
в клетке (трансляция)
Трансляция – это
процесс воплощения генетической информации
мРНК в структуру полипептида. Зрелая
мРНК выходит яз ядра в цитоплазму,
где соединяется с рибосомой.
Инициация трансляции начинается
со стартового кодона (АУГ), который локализуется
в смысловой части гена кодирующую аминокислоту
метиламин. Аминокислоты доставляются
к рибосоме тРНК, специальной для каждого
вида аминокислот. Участок рибосомы, куда
доставляется аминокислоты называется
аминоацильный (α-участок).
Участок рибосомы, где
происходит рост полипептидной цепи,
называется пептидильным.
Этап элонгации связан с последовательным
включением аминокислот в рост полипептидной
цепи.
Этапы элонгации:
- Связывание
антикодона тРНК, несущей аминокислоту
с кодоном мРНК в свободном α-участоке
на рибосоме.
- Образование
пептидной связи между аминокислотами,
когда в α- и ∏-участке находится тРНК
с аминокислотами.
- Транслокация.
тРНК ∏-участка открывается от аминокислоты
и покидает рибосому. тРНК из α-участка
переходит в ∏-участок и рибосома перемещается
вдоль мРНК на 1 кодон.
Терминация трансляции
происходит, когда на мРНК в α-участке
будет 1на из 3х стопкодонов (УАА, УАГ, АГА).
РНК
Рибонуклеиновые кислоты
бывают нескольких видов. Есть рибосомальная,
транспортная и информационная РНК.
Нуклеотид РНК состоит из одного
из азотистых оснований (аденина, гуанина,
цитозина и урацила), углевода - рибозы
и остатка фосфорной кислоты.
Молекулы РНК - одноцепочковые.
Рибосомальная РНК (рРНК)
в соединении с белком входит в состав
рибосом. Р-РНК составляет 80% от всей РНК
в клетке. На рибосомах идет синтез белка.
Информационная РНК (и-РНК)
составляет от 1 до 10% от всей РНК в
клетке. По строению и-РНК комплементарна
участку молекулы ДНК, несущему информацию
о синтезе определенного белка.
Длина и-РНК зависит от длины
участка ДНК, с которого считывали
информацию. иРНК переносит информацию
о синтезе белка из ядра в цитоплазму.
Транспортная РНК
(тРНК) составляет около 10% всей РНК Она
имеет короткую цепь нуклеотидов и находится
в цитоплазме. тРНК присоединяет определенные
аминокислоты и подвозит их к месту синтеза
белка к рибосомам. ТРНК имеет форму трилистника.
На одном конце находится триплет нуклеотидов
(антикодон), кодирующий определенную
аминокислоту. На другом конце имеется
триплет нуклеотидов, к которому присоединяется
аминокислота. При комплементарности
триплета тРНК (антикодона) и триплета
иРНК (кодона), аминокислота занимает определенное
место в молекуле белка.
РНК находится в ядрышке,
в цитоплазме, в рибосомах, в митохондриях
и пластидах. В природе есть еще
один вид РНК. Это вирусная РНК. У
одних вирусов она выполняет функцию
хранения и передачи наследственной информации.
У других вирусов эту функцию выполняет
вирусная ДНК.
№10
Клетка как открытая саморегулирующаяся
биологическая система
Аденозинмонофосфорная
кислота (АМФ) входит в состав всех РНК.
При присоединении еще двух молекул фосфорной
кислоты (Н3РО4) АМФ превращается
в аденозинтрифосфорную кислоту (АТФ)
и становится источником энергии, необходимой
для биологических процессов, идущих в
клетке.
Схема передачи энергии
с помощью АТФ из реакций, в
результате которых энергия освобождается
(экзотермические реакции), в реакции,
потребляющие эту энергию (эндотермические
реакции). Последние реакции очень
разнообразны: биосинтез, мышечные сокращения
и т.д. Аденозинтрифосфорная кислота
(АТФ) состоит из азотистого основания
аденина, сахара — рибозы и трех
остатков фосфорной кислоты. Молекула
АТФ очень неустойчива и способна
отщеплять одну или две молекулы
фосфата с выделением большого количества
энергии, расходуемой на обеспечение всех
жизненных функций клетки (биосинтез,
трансмембранный перенос, движение, образование
электрического импульса и др.). Связи
в молекуле АТФ называют макроэргическими.
Отщепление концевого фосфата от молекулы
АТФ сопровождается выделением 40 кДж энергии.
Синтез АТФ происходит в митохондриях.
Энергетический
обмен (диссимиляция)
представляет собой
совокупность реакций расщепления
органических веществ, сопровождающихся
выделением энергии. В зависимости
от среды обитания энергетический обмен
может протекать в 2а или в 3и этапа.
У большинства организмов
– аэробов, живущих в кислородной
среде, в ходе диссимиляции осуществляется
3и этапа: подготовительный, бескислородный
и кислородный, в процессе которых органические
вещества расщепляются до неорганических.
- Подготовительный этап.
На этом этапе происходит ферментативное
расщепление сложных органический соединений
на более простые (белков – до аминокислот,
жиров – на глицерин и жирные кислоты,
полисахаридов – до моносахаридов, нуклеиновых
кислот – до нуклеотидов). Распад органических
субстратов пищи происходит на разных
уровнях желудочно-кишечного тракта многоклеточных
организмов. Внутриклеточное расщепление
происходит под действием гидролитических
ферментов лизосом. Высвобождающаяся
при этом энергия рассеивается в виде
теплоты, а образующиеся малые органические
молекулы могут подвергаться дальнейшему
расщеплению или использоваться клеткой
как «строительный материал» для синтеза
собственных органических соединений.
- Неполное расщепление
(бескислородный этап) – осуществляется
непосредственно в цитоплазме клетки,
в присутствии кислорода не нуждается
и заключается в дальнейшем расщеплении
органических субстратов. Главным источником
энергии в клетке является глюкоза. Бескислородное,
неполное расщепление глюкозы называют
гликолизом.
Гликолиз – многоступенчатый ферментативный
процесс превращения шестиуглеродной
глюкозы в 2е трёхуглеродные молекулы
пировиноградной кислоты (пирувата, ПВК)
С3Н4О3.
В ходе реакции
гликолиза выделяется большое количество
энергии – 200 кДж/моль. Часть этой энергии
(60%) рассеивается в виде теплоты, а остальное
(40%) используется на синтез АТФ. В результате
гликолиза одной молекулы глюкозы образуется
по 2е молекулы ПВК, АТФ и воды,
а так же атомы водорода, которые запасаются
клетной в форме НАД*Н, то есть в составе
переносчика – никонинамидадениндинуклеотида.
Суммарная формула гликолиза имеет следующий
вид:
С6Н12О6+2АДФ+2Ф+2НАД+
→ 2С3Н4О3+2АТФ+2Н2О+2НАД*Н
дальнейшая
судьба продуктов гликолиза –
пирувата и водорода в форме НАД*Н
– может складываться по-разному.
У дрожжей или в клетках
растений при недостатке кислорода
происходит спиртовое брожение –
ПВК восстанавливается до этилового
спирта:
(пируват) СН3СОСООН → СО2+СН3СОН
(укс. альдегид)
(укс. альдегид) СН3СОН+НАД*Н →
С2Н5ОН (этил. спирт)+НАД+
В клетках
животных, испытывающих временный недостаток
кислорода, например в мышечных клетках
человека при чрезмерной физической
нагрузке, а так же у некоторых
бактерий происходит молочнокислое
брожение, при котором пируват
восстанавливается до молочной кислоты: