Морфология риккетсий. Патогенез, клиника, лабораторная диагностика

Рестрикционный анализ требует для своего осуществления большого количества ДНК, что на первых этапах генетического изучения риккетсий требовало накопления биомасс риккетсий на чувствительных моделях (желточные мешки куриных эмбрионе, культуры клеток). Использование методов, основанных на полимеразной цепной реакции, является более рациональным. При этом не только не требуется длительное культивирование микроорганизмов, но часто эти варианты генетического анализа сказываются более чувствительными и специфичными.

В основе предложенного R.L. Regneiy (1991) метода идентификации и дифференциации риккетсий был положен анализ генов, кодирующих цитратсинтазу (gltA) и белок rOmpA (отрА), основанный за полиморфизме фрагментов рестрикции. Цитратсинтаза является компонентом почти всех живых клеток и ферментом главного цикла метаболизма - цикла лимонной кислоты, играющей ключевую роль в выработке энергии и в обеспечении биосинтетических метаболитов. При помощи ПЦР - амплификации было показано присутствие этого гена в хромосомах всех риккетсий. Определение ПЦР ПДРФ профилей, полученных после расщепления продуктов ПЦР с рестгедсгазой (эндонуклеазой) Alu 1, было использовано для изучения геномных различий риккетсий. Только пять генотипов имели свои характерные профили- R. akari, R. australis , R. japonica, R. massiliae и R. bellii. Все остальные виды изученных риккетсий группы КПЛ характеризовались идентичными профилями.

Дендрограмма генотипического родства секвенсов риккетсиальной цитратсинтазы, полученная в результате анализа ПЦР ПДРФ и оценки процента замены нуклеотидных оснований, свидетельствует о промежуточном положении R. canadensis между кластером, включающим риккетсий сыпнотифозной группы (R. prowazekii, R. typhi), и другим кластером, включающим риккетсии группы КПЛ (Regnery R.L. et al., 1991). Установлена гетерогенность вида R. conorii. Используя праймеры, амплифицирующие 532 первых основания и ферментативное расщепление : помощью эндонуклеаз Pst 1 и Rsa 1, можно дифференцировать все изученные риккетсий группы КПЛ, за исключением R. africae и R. parkeri (Eremeeva М.Е. et al., 1994).

Несмотря на высокую перспективность, особенно для диагностики новых  риккетсиозов и анаплазмозов, эти  методы, основанные на ПЦР, не нашли  широкого применения в практике ввиду  сложности и трудоемкости, а также  в связи с методическими проблемами взятия и исследования клинического материала от больных. Тем не менее с помощью методов генодиагностики в последние годы доказана этиологическая значимость возбудителей ряда новых риккетсиозов - вызываемого R. slovaca синдрома TIBOLA (англ. - tick borne lymphoadenopathy - «лимфоаденопатия после присасывания клеща»), риккетсиоза, вызываемого R. heilongjiangensis, и др.

Оптимальным для идентификации  риккетсий является метод сравнения  нуклеотидных последовательностей  продуктов ПЦР-амплификации. Первоначально  при изучении риккетсиального генома был секвенирован и использован для проведения филогенетического анализа рода Rickettsia ген 16S rRNA (Stochard D.R., Fuerst Р.А., 1995; Roux V., Raoult D., 1995). Специфические последовательности были определены для каждого вида (серотипа), при этом установлено высокое сходство последовательностей - от 97,2 до 99,9 %. В бактериологии принятым критерием для отнесения различных штаммов к одному виду является 70 %-ный уровень гомологии ДНК (Wayne L.G. et al., 1987). Применение этого критерия к риккетсиям группы КПЛ показывает его относительность. На основании этого критерия R. rickettsii, R. conorii, R. sibirica и R. montanensis должны быть отнесены к одному виду (Walker D.H., 1988,1989). Понятно, что сравнение последовательностей 16S rRNA с учетом высокой степени гомологии риккетсий является оптимальным подходом для филогенетического анализа. Для многих представителей рода Rickettsia были изучены и некоторые другие последовательности — отрА, отрВ, git А, ген, кодирующий 17 кДа, которые также используются для классификации и номенклатуры риккетсий.

Лечение и профилактика.

Наиболее эффективными и доступными средствами антибиотикотерапии риккетсиозов и лихорадки цуцугамуши являются препараты группы тетрациклинов  и фторхинолонов. В лечении лихорадки Ку, равно как и риккетсиозов групп СТ и КПЛ, назначают преимущественно доксициклин, обладающий наилучшими фармакокинетическими характеристиками в отношении этих внутриклеточных микроорганизмов. Назначение тетрациклина или доксициклина в общетерапевтических дозах (2,0 г тетрациклина или 200 мг доксициклина в 2 капсулах в сутки для взрослого) при острых формах риккетсиозов и лихорадки цуцугамуши является эффективным и позволяет нормализовать температуру и улучшить состояние больного в течение 36-96 часов с начала лечения. В связи с возможностью длительной персистенции риккетсий и ориенций лечение необходимо продолжать 2-3 дня после нормализации температуры.

Разработана и применяется живая  сыпнотифозная вакцина. Однако наибольшее значение в профилактике СТ имеет борьба с педикулезом, своевременное лабораторное обследование на сыпной тиф длительно лихорадящих больных, особенно из категорий риска (завшивленные, бездомные, беженцы и др.). Применительно к риккетсиозам группы КПЛ и лихорадке цуцугамуши применяют противоклещевые обработки территорий, меры личной защиты от нападения и присасывания клещей, возможно превентивное назначение антибиотиков.

Список используемой литературы.

1. Зверев Е. И. Тифо-паратифозные болезни в прошлом и настоящем. М., 1967.
2. Лобан К. М. Важнейшие риккетсиозы человека. Л., 1980.
3. Равич-Биргер Е. Д., Эпштейн-Литвак Р. В. Бактериологические и серологические методы исследования при инфекционных заболеваниях. М., 1965.
4. Здродовский П. М., Голиневич Е. М. Учение о риккетсиях и риккетсиозах, М: 1978 г.
5. Паутов В. Н. Некоторые вопросы экологии риккетсий. Журнал. микр. эпид. и иммун. № 5, с. 92, 1987 г.