Методы выделения нуклеиновых кислот из биологического материала

При выборе метода выделения необходимо учитывать приоритет предъявляемых к нему требований, таких как высокий выход нужной нуклеиновой кислоты, быстрота метода, большая пропускная способность или высокое качество продукта. Существуют различные методы, позволяющие выделять нуклеиновые кислоты из широкого спектра образцов, но лишь малое их число пригодно для автоматизации. Присутствие загрязняющих веществ, например белков или карбогидратов, в таких комплексных смесях часто мешает реализовать необходимые реакции и методики.

Методы выделения нуклеиновых кислот можно разделить по основным физическим и биохимическим признакам на следующие классы:

жидкофазные методы;
твердофазные методы;
фракционирование ДНК и РНК

ВВЕДЕНИЕ 4
1 Нуклеиновые кислоты 5
1.1 Типы и распространение нуклеиновых кислот. 6
1.2 Общие свойства нуклеиновых кислот 7
1.2.1 Химическая структура. 7
1.2.2 Трехмерная структура. 7
1.2.3 Правило комплементарности 8
1.2.4 Правила Чаргаффа 8
1.3 Функция нуклеиновых кислот 10
1.3.1 Репликация и транскрипция. 10
1.3.2 Трансляция 11
1.3.3 Транспортные РНК и супрессия 13
1.4 Значение нуклеиновых кислот 14
2 Макромолекулярная структура ДНК 15
2.1 Выделение дезоксирибонуклеиновых кислот 17
2.1.1 Фракционирование ДНК 17
3 Макромолекулярная структура РНК 18
3.1 Выделение рибонуклеиновых кислот 19
3.1.1 Фракционирование РНК 19
4 Жидкофазные методы выделения нуклеиновых кислот 22
4.1 Классические методы выделения нуклеиновых кислот 22
4.2 Методы, позволяющие выделить ДНК и РНК одновременно 22
5 Твердофазные методы выделения нуклеиновых кислот 24
5.1 Основные принципы твердофазных методов 24
5.1.1 Метод выделения нуклеиновых кислот на стекле 24
5.1.2 Метод на основе магнитной сепарации 25
6 Другие методы выделения нуклеиновых кислот 28
6.1 Определение первичной структуры (секвенирование) нуклеиновых кислот. 28
6.3 Спектрофотометрический анализ 30
6.3 Амплификация нуклеиновых кислот 33
6.3.1 Методы амплификации нуклеиновых кислот 33
6.3.2 Форматы амплификации нуклеиновых кислот в режиме "реального времени": 33
6.3.3 Методы амплификации нуклеиновых кислот микроорганизмов I - IV групп 34
6.4 Метод количественного анализа нуклеиновых кислот 35
6.5 Сканирующая зондовая микроскопия нуклеиновых кислот 36
6.5.1 Основные методики препарирования образцов для зондовой микроскопии нуклеиновых кислот 36
6.5.2 Применение зондовой микроскопии для исследования структуры и свойств молекул нуклеиновых кислот и их комплексов 40
7 Заключение 41
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 42