Процесс мочеобразования

Подходы к стандартизации анализа мочи

1) обеспечить пациентов  инструкциями о правилах сбора 

мочи;

2) для улучшения усвоения  инструкции материал пред-

почтительно предоставлять  в форме иллюстраций;

3) убедиться в том, что  пациенты усвоили положения инс-

трукции.

Мероприятия Содержание инструкции

Инструктирование 

пациента

Ознакомление с инструкциями в

письменной и устной форме.

Контроль усвоения содержания

инструкций

Ограничение

потребления жидкости

Не потреблять жидкость после 22 ч 

(допустимо не более  1/2–1 стакана 

воды).

Собирают первую или вторую

утреннюю порцию мочи

Физическая активность

Избегать физической нагрузки

накануне вечером и  утром перед

получением образца мочи

Образец мочи

По возможности удержаться от

мочеиспускания в течение 4–6 ч,

чтобы обеспечить превращение  в

мочевом пузыре нитратов в нитриты

под действием бактерий

Предотвращение 

бактериального 

загрязнения образца

Провести надлежащий туалет

наружных половых органов.

Собрать в контейнер «среднюю» 

порцию мочи.

В исключительных случаях  — 

использование катетера, при  крайней 

необходимости — надлобковая

пункция

Правила получения образцов мочи определены мето-

дическими рекомендациями «Взятие и доставка биомате-

риалов для клинико-лабораторных исследований в клини-

ко-диагностических лабораториях» (М., 1979): «…Больной

утром в чистую стеклянную посуду собирает все количест-

во выделенной мочи и доставляет в лабораторию не позже

0,5–1,5 ч после выделения». Эти образцы используют для

анализа ее химического и  клеточного состава [6].

Образцы мочи

Результаты исследования мочи могут стать недосто-

верными при несоблюдении определенных правил во

время сбора и хранения образцов мочи. В зависимости 

от цели исследования образцы  мочи собирают либо в

виде отдельных порций, либо за определенный проме-

жуток времени.

А. В. Козлов,

д-р мед. наук

Г. Д. Большакова,

канд. мед. наук

В. А. Зимина,

канд. мед. наук

Д. Г. Осташова

Рассмотрены подходы, способствующие стандарти-

зации выполнения анализа мочи.

g ОБЗОРЫ

Во избежание загрязнения  мочи различными внешними

примесями перед сбором образца  следует провести тщатель-

ный туалет наружных половых органов. Спонтанные порции

мочи, собранные без соблюдения специальных предосторож-

ностей, особенно у женщин, часто являются контаминирован-

ными, например, лейкоцитами или эритроцитами. При возмож-

ности необходимо избегать сбора мочи для исследования на

фоне менструации и в течение 2–3 дней после ее завершения.

Перед сбором мочи область  вокруг отверстия мочеиспуска-

тельного канала должна быть вымыта водой с мылом; первая

порция мочи не собирается. Для женщин желательно исполь-

зование тампонов для предотвращения контаминации выде-

лениями из влагалища. Лежачих больных предварительно

подмывают, затем промежность  вытирают сухим стерильным

ватным тампоном в направлении  от половых органов к задне-

му проходу. У лежачих больных, собирая мочу, необходимо

следить, чтобы сосуд был  расположен выше промежности во

избежание загрязнения из области анального отверстия. Же-

лательно использовать широкогорлый сосуд с крышкой, по

возможности надо собирать мочу сразу в емкость, в которой 

она будет доставлена в  лабораторию. Мочу из судна, утки,

горшка не следует брать, так как даже после прополаскива-

ния этих сосудов на дне и стенках может сохраняться осадок

фосфатов, способствующих изменению  состава мочи. В тех 

случаях, когда в лабораторию  доставляется не вся собран-

ная моча, перед сливанием ее части необходимо тщательное

взбалтывание, чтобы осадок, содержащий форменные эле-

менты и кристаллы, не был утрачен.

По сути, эти образцы  соответствуют так называемой ночной

порции — overnight collection, или образцу мочи, собранному за

фиксированный промежуток времени  — timed urine specimen в

рекомендациях NKF (National Kidney Foundation). Данный про-

межуток может составлять 8, 4 или 2 часа. В некоторых зару-

бежных руководствах эту пробу мочи иногда обозначают как

«первую утреннюю» пробу (first morning specimen).

Кроме того, исследуют так  называемую вторую утрен-

нюю порцию мочи (second, double-voided specimen). Ее

собирают в утренние часы после опорожнения мочевого

пузыря. Мочу, собранную за сутки (24-hour urine specimen),

используют для количественного  определения различных

компонентов мочи, в частности, суточной потери белка или 

альбумина. Стандартизация

преаналитического этапа в лаборатории

Перед проведением анализа  образцы должны быть дове-

дены до комнатной температуры.

Исследование химического  состава мочи

Поскольку на анализ мочи, особенно на этап микроско-

пии осадка, расходуется много времени, было проведено

большое количество исследований, целью которых явилась 

разработка подходов, позволяющих  исключить данный этап

или минимизировать количество микроскопических иссле-

дований осадка мочи [7].

Для этого в настоящее  время повсеместно используют

надежные и апробированные в течение многих лет техноло-

гии количественной оценки ряда химических компонентов

в «здоровой» и «патологической» моче, основанные на ис-

пользовании тест-полосок. Исследование химического со-

става мочи с помощью тест-полосок (dipstick methodology)

представляет собой стандартную  аналитическую процедуру,

основанную на технологических приемах так называемой

«сухой химии» (dry chemistry) [8]. При данном способе ана-

лиза все необходимые для конкретной реакции компонен-

ты — буферный раствор, индикатор, ферменты, субстрат и 

др. — наносятся в фабричных  условиях на бумажную или

пленочную основу.

Прообразом современных тест-полосок явились пропи-

танные хлоридом олова полоски шерстяной ткани, пред-

ложенные в 1850 г. французским химиком Jules Maumene

(1818–1898). При нанесении  капли мочи на поверхность 

такой полоски и нагревании в пламени свечи полоса не-

медленно чернела, если моча содержала сахар (глюкозу).

Несмотря на простоту, метод  не получил широкого распро-

странения, и потребовалось почти 70 лет, прежде чем вен-

ский химик Fritz Feigl (1891–1971) разработал так называ-

емый spot analysis.

В последующие годы многие врачи, прежде всего в Ве-

ликобритании, проявили интерес к работам английского

физиолога George Oliver (1841–1915), который предложил

в 1883 г. «Urinary Test Papers» и визуальный способ оценки

результатов.

Применение приборов, работающих на принципе отража-

тельной фотометрии, позволяет  использовать тест-полоски

для количественной оценки результатов. Отражательный 

фотометр является устройством  со сложной оптической

схемой, регистрирующим не интенсивность окраски сен-

сорных элементов тест-полоски, а интенсивность монохро-

матического светового потока, отраженного от поверхности

каждого сенсорного элемента. В автоматическом режиме

осуществляется фотометрия и производятся расчет и распе-

чатка результатов.

В настоящее время химический анализ мочи может быть

выполнен с использованием тест-полосок, выпускаемых

разными производителями. В  таблице приведены харак-

теристики параметров тест-полосок для исследования

мочи, производимых компанией Roche Chemstrip и Bayer

N-Multistix [9].

В некоторых тест-полосках имеется дополнительная

аналитическая зона, позволяющая  оценить уровень аскор-

биновой кислоты в моче и учесть риск получения неправиль-

ных результатов при определении таких показателей, как

гемоглобин, белок, глюкоза, билирубин [10]. При отсутс-

твии подобной зоны на тест-полоске необходимо внима-

тельно ознакомиться с перечнем лекарственных препара-

тов, которые принимает пациент. Компании-изготовители в

инструкциях информируют о соединениях, способных вме-

шиваться в ход химических реакций, и об источниках лож-

ноположительных и ложноотрицательных результатов.

В ряде случаев положительные  результаты, полученные

при использовании тест-полосок, могут потребовать под-

тверждения с использованием химических и микроскопичес-

ких методов. Использование консервантов нежелательно,

поскольку они могут ингибировать ряд химических реакций.

С помощью тест-полосок могут быть определены следую-

щие аналиты, входящие в перечень показателей химическо-

го состава мочи (таблица):

— относительная плотность;

— рН;

— белок;

— глюкоза;

— кетоновые тела;

— билирубин;

— уробилиноген;

— эритроциты/гемоглобин;

ОБЗОРЫ gТаблица.

Практическая чувствительность тест-полосок

Chemstrip и �-Multistix

Параметр Тест-полоски

Chemstrip �-Multistix

pH� 5 –9 ��1 1 ед. pH� едед. pH� . p. pH�H� 5 –9 ��l l ед. p. pH�H�

Белок 60 мгмг/ллл 50 – – 200 мг/л 200 мг/л мгмгл/лл

Глюкоза 400 мгмг/ллл 750 мгмг/ллл

Кетоновые тела тела 50 мг/л ацетоуксусной

кислоты

400 – 700 мг/л ацетона

90 мг/л ацетоуксусной

кислоты 800 – 1400 мг/л 

ацетона

Относительная

плотность

1.000 – 1.030 1.000 – 1.030

Билирубин 5 мг/л 4 - 8 мг/л

Кровь (эритроциты) 5 эритроцитов/мкл 

или гемоглобин из 10

эритроцитов/мкл

5 – 20 эритроцитов/мкл 

или гемоглобин из 5

эритроцитов/мкл

Уробилиноген 4 мгмг/ллл 2 мгмг/ллл

Нитриты 0.5 мг/л мгмгл/лл 0.6 – – 1 мг/л 1 1 мг/л мгмгл/лл

Эстераза лейкоцитов 6 – 10 лейкоцитов в

поле зрения (hpf hpf)�

5 – 15 лейкоцитов в поле 

зрения (hpf hpf)

� hpf – high po f – high po – high po oo�eer field –поле зрения при большом увеличении r field –поле зрения при большом увеличении fieled –поле зрения при большом увеличении d –поле зрения при большом увеличении –поле зрения при большом увеличении

 

— нитриты;

— лейкоциты (эстераза нейтрофилов);

— аскорбиновая кислота (дополнительный параметр).

Правила хранения и использования  тест-полосок

Тест-полоски должны храниться в упаковке предприятия-

изготовителя в сухом  месте при температуре от 10 до 30 °С

(при отсутствии паров  кислот, щелочей и органических  рас-

творителей) в течение всего срока годности. Необходимо

предохранять тест-полоски от повышенной влажности и по-

падания прямых солнечных  лучей на цветную шкалу. После 

вскрытия пенала тест-полоски должны быть использованы в

течение не более 5 месяцев. Извлеченная  из упаковки тест-по-

лоска должна быть использована для проведения анализа в

течение часа. Каждый раз  после извлечения полоски из пена-

ла последний следует немедленно и плотно закрыть крышкой.

Тест-полоски поставляются в виде комплекта, который состо-

ит из 25, 50, 75 или 100 полосок, упакованных в пенал, снаб-

женный влагопоглощающим элементом в крышке или внутри

пенала — мелкопористым  силикагелем, поглощающим влагу 

при открывании пенала. Это  обеспечивает длительный срок

хранения полосок даже после вскрытия пенала. Каждый ком-

плект полосок снабжен этикеткой и инструкцией по примене-

нию. Для получения надежных результатов необходимо стро-

гое соблюдение инструкции по применению тест-полосок.

Методика проведения исследования

Необходимое для анализа  количество полосок извлечь 

из пенала, не прикасаясь руками к аналитическим зонам.

Перед исследованием мочу тщательно перемешивают.

Тест-полоску погружают  в емкость с исследуемой мочой,

извлекают, удаляют ее избыток. При использовании от-

ражательного фотометра тест-полоску после удаления

избытка мочи помещают в специальный  держатель, транс-

портер или на место  считывания результата (в зависимости 

от конструкции прибора). Применение приборов, работа-

ющих на принципе отражательной фотометрии, позволя-

ет использовать тест-полоски для количественной оценки

результатов.

При визуальной оценке сравнивают интенсивность окрас-

ки реагентной зоны тест-полоски с подходящей зоной цвето-

вой шкалы на поверхности  контейнера для хранения тест-по-

лосок и оценивают результат. Шкала разбита на интервалы,

которым соответствует определенная концентрация иссле-

дуемого компонента. Результаты могут быть выражены как 

в единицах концентрации, так  и в виде полуколичественной

балльной оценки. В этом случае констатируется факт обна-

ружения различных количеств анализируемого компонента

в образце или его отсутствие: «Negative», «Trace», «+1»,

«+2», «+3», «+4».

Стандартизация аналитического этапа, проводимого 

тест-полосками [5]

Основные аналитические  зоны тест-полосок, предназна-

ченные для определения эритроцитов, лейкоцитов, альбу-

мина и нитритов с помощью  анализатора, необходимо про-

верять и калибровать с использованием количественных

методов: счетная камера для  эритроцитов и лейкоцитов,

количественное определение  белка в моче с пирогаллоло-

вым красным и раствором нитрита натрия, приготовленного

на «пулированной» моче. Эту процедуру следует проводить

при замене партии тест-полосок на новую партию.

При ежедневном внутрилабораторном контроле качества

следует использовать образцы  неразведенных и разведен-

ных в 10 раз контрольных растворов (Liquichek, «Bio-Rad»,

США). Существенное преимущество использования коли-

чественных данных заключается в том, что они могут быть

оценены для каждого используемого параметра в виде ве-