Получение спермы посредством искусственной вагины. Кратность осеменения у различных видов животных

ФГБОУ ВПО Московская государственная  академия ветеринарной медицины и 

                                          биотехнологии имени К.И.Скрябина

 

                                           Факультет ветеринарной медицины

                      

                Кафедра акушерства, гинекологии и биотехники репродукции животных

 

                                                          

 

 

                                                       Реферат на тему:

“Получение спермы посредством искусственной вагины. Кратность осеменения у различных видов животных”

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                                                                                                      Выполнила

                                                                                                                      Студентка 8 группы

                                                                                                                                  4 курса ФВМ

                                                                                                Рахматуллина Ирина Асхатовна

 

 

                                                                 Москва 2014

                                                   Содержание

 

1. Введение...........................................................................................................................3
2. Искусственная вагина.....................................................................................................4
3. Методика получения спермы посредством искусственной вагины..........................5
4. Техника искусственного осеменения самок животных............................................10
5. Список литературы.......................................................................................................14

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                Введение   

   Искусственное осеменение - это введение спермы в половые органы самки с помощью специальных инструментов. Основное преимущество искусственного осеменения заключается в том, что оно позволяет получить во много раз больше потомства, чем при естественном осеменении, от наиболее ценных самцов, а также предупредить инфекционные и инвазионные болезни. Искусственное осеменение включает в себя пять основных процессов: получение спермы от производителя, ее оценку, разбавление, хранение и введение в половые органы самки. Сперма животных состоит из двух частей: спермиев и плазмы (секретов придатка семенника и придаточных половых желез). По химическому составу сперма — одна из наиболее сложных жидкостей. От 85 до 98 % ее массы составляет вода, а остальное — сухие вещества: белки, липиды, сахара, минеральные вещества, ферменты, витамины и др. Годовая половая нагрузка на производителя при осеменении и основные показатели спермы разных видов животных представлены в табл. Сперму от производителей на станциях искусственного осеменения получают в искусственную вагину

Таблица. Годовая половая нагрузка на производителя при осеменении

Производитель	При естественном осеменении самок		При искусственном  осеменении самок
	Ручная случка	Вольная случка	Количество закрепленных самок	Режим получения  спермы
Бык	60-100	35-40	2500-5000	По 2 эякулята с интервалом 7—10 мин через 3—4 дня
Жеребец	40-50	20-25	100-300	По одному эякуляту в день; один день в неделю — отдых
Баран	50-60	25-30	1000-3000	По 2 —4 эякулята ежедневно  в сезон осеменения
Хряк	15-20	10-15	100-300	По одному эякуляту в 3 дня

Таблица. Основные показатели спермы разных видов  животных

Вид животного	Объем эякулята, мл		Количество спермиев, млн/мл		Цвет	Консистенция
	средний	максимальный	среднее	максимальное
Бык	4-5	20	1-2	6	Молочно-белый	Сметанообразная
Жеребец	50-100	300	0,2-0,5	0,8	Серовато-белый	Водянистая
Хряк	300	1000	0,1-0,2	1	Мол.-белый	Водянистая
Баран	1-2	5	2-5	8	Белый	Сметанооб.

                                           Искусственная вагина

 
Устройство искусственной  вагины. Искусственные вагины для всех видов сельскохозяйственных животных построены по одному принципу. Они представляют собой прибор, состоящий из цилиндра- остова (из толстостенной резины, для вагины быка и хряка, эбонитового для вагины барана, металлического для жеребца) с патрубком, резиновой камеры, эбонитового краника, резиновых колец, спермоприемника, держателя спермоприемника (уздечки) и отрезка резиновой трубки, надеваемого на краник.

 

Подготовка искусственной вагины. Подготовка искусственной вагины состоит из следующих операций: сборки, мытья, обеззараживания, наполнения горячей водой, смазки резиновой камеры, присоединения спермоприемника, нагнетания воздуха, проверки температуры. Подготовленные искусственные вагины до момента получения спермы должны находиться в термостате при температуре 40° С. 
Сборка. Внутрь цилиндра вставляют резиновую камеру так, чтобы гладкая поверхность ее была обращена в просвет цилиндра, а шероховатая - к его стенкам. Концы резиновой камеры натягивают; на оба края цилиндра. Камера должна быть натянута равномерно без перекручивания и складок. Для большей прочности камеру на цилиндре вагины крепят резиновыми кольцами. 
Мытье. Вагину моют 2-3%-ным раствором натрия гидрокарбоната или 1-1,5%-ным раствором кальцинированной соды при по* мощи ерша, щетки или куска марли, удерживаемой корнцангом. После этого вагину споласкивают чистой горячей водой и насухо вытирают марлей или полотенцем. 
Обеззараживание. Чистую искусственную вагину обеззараживают, протирая внутреннюю поверхность резиновой камеры ватным тампоном, смоченным в 95%-ном этиловом спирте, фиксируя его корнцангом, или кипятят в специальном электрическом стерилизаторе в течение 15-20 мин. 
Наполнение горячей водой. В вагину наливают воду, нагретую до 60-70° С с таким расчетом, чтобы к моменту получения спермы температура внутри искусственной вагины была 40-42° С. В вагину для быка вводят 400-500 мл воды. 
Смазка резиновой камеры. Всю внутреннюю поверхность резиновой камеры смазывают стерильным медицинским вазелином по всей длине, за исключением участка у конца камеры, прилегающего к спермоприемнику. Смазывание производят обожженной на пламени горелки стеклянной палочкой или тампоном, фиксируя его корнцангом. 
Присоединение спермоприемника. Спермоприемник предварительно моют и обрабатывают спиртом или стерилизуют кипячением. Можно его стерилизовать и в сушильном шкафу при температуре 160-180° С. Перед употреблением спермоприемник ополаскивают несколько раз 1%-ным стерильным раствором натрия хлорида. В межстенную полость двухстенных спермоприемников наливают воду, подогретую до 35-40° С, с таким расчетом, чтобы после обогрева стенок вода имела температуру 30-35° С. После заполнения водой отверстие спермоприемника закрывают снизу пробкой. Спермоприемник вставляют в вагину на стороне, конец которой не смазан вазелином. На вагине для быка спермоприемник закрепляют держателем (уздечкой). 
Нагнетание воздуха. В межстенную полость искусственной вагины резиновым баллоном нагнетают воздух до тех пор, пока внутренние стенки резиновой камеры не сомкнутся. 
Проверка температуры. Искусственную вагину держат в наклонном положении спермоприемником вверх (чтобы предотвратить затекание в него вазелина) и в свободный конец ее вставляют спиртовый термометр. Температура в вагине перед получением спермы должна быть не ниже 40° С и не выше 42° С. Снижение температуры в искусственной вагине может привести к торможению половой функции производителя; температура выше 42° С опасна для жизнеспособности сперматозоидов.

 
        Методика получения спермы посредством искусственной вагины

 

 Чтобы получить сперму от быка, барана, жеребца или хряка на искусственную вагину, их приучают делать садку на самку, самца или на чучело, заменяющее самку. Животные, используемые для садки производителей, должны быть здоровы, в особенности в отношении заразных болезней. Методика получения спермы от указанных видов производителей характеризуется следующими особенностями. 
Получение спермы от быка. Для получения спермы от быка-производителя производят садку его на корову, вола или быка. Можно получить сперму также при помощи чучела. Использование коров менее желательно, так как коровы, не находящиеся в охоте, очень беспокойны, что затрудняет взятие спермы. Подготовленную искусственную вагину с прикрепленным к ней спермоприемником берут в правую руку, становятся с правой стороны и держат ее у крупа животного (коровы, вола) наклонно под углом 35-45° к горизонту, спермоприемником вверх. Затем приводят быка. Перед этим его следует почистить щеткой или пылесосом и обтереть увлажненной тряпкой; препуций перед получением спермы обмывают раствором фурацилина 1 :5000 и протирают насухо чистой марлей. Когда бык подготовится, дают садку. В момент прыжка левой рукой берут препуций и направляют половой член в искусственную вагину. Касаться рукой слизистой оболочки полового члена нельзя, так как бык может прекратить садку, не выделив сперму. Сперма выделяется одним толчком в тот момент, когда половой член войдет в вагину. Для стекания спермы в спермоприемник вагину сразу же после окончания садки и извлечения полового члена поворачивают вертикально спермоприемником вниз. После стекания спермы открывают краник и выпускают воздух. Вагину переносят в. лабораторию, снимают держатель, освобождают спермоприемник, ставят его на стол и быстро закрывают крышкой. 
Получение спермы от барана. Для получения спермы от барана на искусственную вагину используют овцу или валуха. Подготовку искусственной вагины для барана производят, как указано выше. В вагину для барана наливают 150-180 мл горячей воды. 
Овцу или валуха фиксируют в станке и впускают барана. Искусственную вагину держат сбоку на уровне таза с правой стороны с наклоном 35-40°, спермоприемником вверх. В момент садки барана осторожно придерживают рукой препуций, не прикасаясь к половому члену, и направляют его в искусственную вагину. После выделения спермы (об этом судят по характерному толчку) отнимают вагину и поворачивают ее спермоприемником вниз. Получив сперму, отделяют спермоприемник и производят разборку и обработку вагины. 
Получение спермы от жеребца. В обработанную искусственную вагину наливают горячую воду в количестве от 1 до 2 л, но воздух не нагнетают (обработку ее производят методом, указанным выше). Для садки разрешается брать только здоровых кобыл. Для предохранения жеребца от ударов на кобылу надевают случную шлею. Если шлеи нет, ее заменяют вожжами. Хвост кобылы от репицы до половины длины плотно бинтуют, отводят в сторону и закрепляют. Жеребца выводят на длинных поводьях (развязках) и останавливают недалеко от кобылы. Если жеребец приготовился, т. е. когда У него наступила эрекция полового члена, его пускают для садки на кобылу. При садке искусственную вагину держат у крупа кобылы с правой стороны, наклонно под углом 30-35° (чтобы половой член и вагина находились в одном направлении). Левой рукой жеребцу осторожно помогают ввести половой член в искусственную вагину, после чего ее удерживают обеими руками до выделения жеребцом спермы. 
О выделении спермы судят по ритмичному сокращению мускулатуры корня хвоста, его подниманию и опусканию. В этот момент выпускают часть воздуха из вагины. Когда выделение спермы заканчивается, вагину постепенно опускают сиермоприемником вниз. 
По окончании садки с вагины осторожно снимают спермоприемник и медленно фильтруют сперму через стерильную, сложенную вчетверо марлю. Фильтруют ее в подогретую до 25-30° С измерительную стеклянную мензурку, которую после наполнения спермой накрывают крышкой.  
Получение спермы от хряка. Сперму от хряка получают с помощью чучела, в которое вставляют искусственную вагину и надежно там ее укрепляют. 
Кроме укороченной бычьей вагины с резиновым цилиндром, для  получения спермы от хряка применяют вагину с металлическим остовом, предложенную Полтавским институтом свиноводства. Спермоприемником к искусственной вагине для хряка (модель ВИЖа) служит стеклянная банка, которая соединяется с цилиндром при помощи отрезка резиновой камеры. В вагину наливают 400 мл горячей воды. Особенно внимательно следят за давлением. Садка , у хряков продолжается 7-10 мин, а иногда до 15-20 мин, поэтому понижение давления в искусственной вагине может затормозить выделение спермы. Для контроля за давлением в вагине пользуются манометром и в случае понижения давления подкачивают воздух в вагину при помощи резиновых шаров. Введенный в манеж хряк осматривается, подходит к чучелу, обнюхивает его и после этого делает садку. В этот момент необходимо осторожно направить половой член в искусственную вагину. О выделении спермы (эякуляции) можно судить по прекращению совокупительных движений, подтягиванию семенников вверх и расслаблению кожи мошонки. В конце эякуляции наблюдается ритмичное движение хвоста и его опускание. 
После получения спермы искусственную вагину вынимают из а чучела, отделяют спермоприемник, закрывают его и сразу же при температуре 18-20° С оценивают качество спермы. Если спермоприемник применялся без фильтра, необходимо а сразу же профильтровать сперму через стерильную, сложенную вчетверо марлю в стеклянную градуированную мензурку с делениями. При фильтровании спермы отделяется зернистый клейкий секрет куперовых желез. Этот секрет затрудняет исследование спермы и  создает очень большие неудобства во время искусственного осеменения свиней, так как забивает канал катетера (зонда). Искусственную вагину после получения спермы разбирают и обрабатывают. 
Разборка искусственной вагины. После работы искусственную вагину разбирают: выпускают воду, снимают краник, тщательно моют вагину содовым раствором, споласкивают чистой горячей водой, насухо вытирают полотенцем и укладывают в специальный шкаф. Хранение невымытой искусственной вагины запрещается. 
Оценка качества спермы по внешним признакам. При оценке качества спермы по внешним признакам учитывают ее объем, цвет и запах. Объем спермы от быка и барана определяют измерительной пипеткой или шприцем с точностью до 0,1 мл, а от жеребца И хряка - градуированной мензуркой. Объем спермы от быка колеблется от 2 до 10 мл, барана - от 0,5 до 2 мл, жеребца - от 50 до 150 мл и хряка - от 150 до 800 мл. Нормальная сперма имеет молочно-белый или белый с желтоватым оттенком цвет и слабый запах жиропота. Категорически запрещается применять для осеменения загрязненную сперму с гнилостным запахом или имеющую розовато-красный, бурый или зеленоватый цвет. 
Оценка спермы по густоте и подвижности сперматозоидов. Качество спермы оценивают под микроскопом при увеличении в 120- 280 раз при неярком освещении. Определяют густоту спермы и активность сперматозоидов в раздавленной капле. Для этого на чистое предметное стекло наносят стеклянной палочкой или пипеткой каплю исследуемой спермы, покрывают ее покровным стеклом так, чтобы под ним не образовалось пузырьков воздуха, и просматривают под микроскопом. 
Густоту спермы оценивают по количеству сперматозоидов (под микроскопом). При этом различают:

1) густую сперму, обозначаемую  буквой Г,- все поле зрения микроскопа  сплошь заполнено сперматозоидами;

2) среднюю сперму, обозначаемую  буквой С,- между сперматозоидами  заметны промежутки, но размеры  их меньше длины сперматозоида;

3) редкую сперму, обозначаемую  буквой Р,- в поле зрения микроскопа  имеются промежутки между сперматозоидами,  превышающие длину последних. 
Если сперматозоиды совершенно отсутствуют, сперму обозначают буквой А. 
Подвижность сперматозоидов оценивают глазомерно по десятибалльной шкале, причем в расчет принимается только прямолинейное движение их. Если 100 сперматозоидов имеют поступательное движение, ставят высший балл-10, при 90% поступательно движущихся сперматозоидов ставят 9, а при 80%-8 и т. д. При единичных подвижных сперматозоидах (менее 10 из 100), имеющих поступательное движение, сперму обозначают буквой Е. При колебательном движении сперматозоидов сперму обозначают буквой К, при неподвижности сперматозоидов - буквой Н. 
Таким образом, при записи густоту спермы обозначают буквой, а подвижность сперматозоидов - цифрой. Примеры: Г-9 - сперма густая, около 90% сперматозоидов имеют прямолинейное поступательное движение; С-5 - сперма средней густоты, около 50% сперматозоидов имеют прямолинейное поступательное движение и т. д. 
Для искусственного осеменения считают пригодной: сперму барана - только густую, с активностью не ниже 8 баллов; сперму быка - густую и среднюю, с активностью не ниже 7 баллов; сперму хряка - густую и среднюю, с активностью не ниже 6 баллов, и редкую, с активностью не ниже 8 баллов; сперму жеребца - при концентрации сперматозоидов в 1 мл не менее 50 млн. и активности не ниже 5 баллов. 
Определение концентрации сперматозоидов. Определение количества сперматозоидов (миллионов) в 1 мл, т. е. их концентраций производят на станции искусственного осеменения в счетной камере применяемой для подсчета форменных элементов крови (с сеткой Горяева, Тома-Цейса или Тюрка). Подсчет сперматозоидов производят микроскопически (см. Инструкцию по искусственному осеменению ). 
Определять концентрацию сперматозоидов в сперме жеребца и быка можно по специальным стандартам (запаянные пробирки с мутной жидкостью, каждая из которых по степени мутности соответствует сперме с определенной концентрацией сперматозоидов). 
Определение переживаемости сперматозоидов. Под иережнваемостью сперматозоидов понимают продолжительность их жизни вне организма. Переживаемость устанавливают применительно к определенному способу хранения спермы путем периодических оценок подвижности сперматозоидов. Если разбавленную сперму хранят при 0° С, то оценку активности определяют через каждые 24 ч. При этом выделяют время, в течение которого сперма остается пригодной для использования, и время, прошедшее от начала хранения спермы до полного прекращения движения сперматозоидов. 
Активность сперматозоидов оценивают микроскопически при температуре 38-40° С. Сперма хорошего качества, полученная от быка, на 3-й сутки должна иметь активность не ниже 7 баллов, на 4-е сутки- не ниже 6 баллов. 
Результаты контрольных исследований после каждой проверки заносят в специальную тетрадь по соответствующей форме, предусмотренной Инструкцией по искусственному осеменению.

Разбавление спермы. Чтобы увеличить объем эякулята, а также сохранить оплодотворяющую способность спермиев на более длительный срок при хранении спермы вне организма, ее надо разбавлять специальными биологическими или синтетическими средами. Сперму быка можно разбавлять в 50 — 100 раз. В одной дозе должно быть не менее 15 млн подвижных спермиев. Ее сохраняют при температуре 0 — 5 °С. Она должна иметь в течение 3 сут оценку подвижности не ниже 7 баллов. Замороженную сперму используют после оттаивания при ее подвижности не ниже 4 баллов. Сперму барана разбавляют в 2 —4 раза (80 млн подвижных спермиев в одной дозе, подвижность не ниже 8 баллов, а замороженная после оттаивания — не ниже 4 баллов); сперму жеребца — в 2 — 4 раза (150 — 300 млн подвижных спермиев, незамороженную сперму используют с оценкой ее подвижности не ниже 5 баллов, а замороженную после оттаивания — не ниже 2 баллов); сперму хряка — в 2—10 раз (не менее 3 млрд подвижных спермиев в одной дозе с подвижностью при хранении в течение 2 сут не ниже 6 баллов, а замороженную после оттаивания — не ниже 4 баллов). Сперму жеребца и хряка сразу после получения перед разбавлением обязательно фильтруют через стерильную марлю. Сперму нужно разбавлять не позже чем через 5 — 10 мин после ее получения.

Хранение и  транспортирование спермы. Применяют два метода сохранения спермы: краткосрочное хранение при температурах, близких к комнатной (16— 18 °С), в течение нескольких часов (не более 6—12 ч) и при температуре 0 —5°С в течение 1 — 3 сут; долгосрочное — в замороженном состоянии при температуре минус 196 °С. Краткосрочно хранят в холодильниках или термосах разной конструкции, а долговременно (годы, десятилетия) — в сосудах Дьюара с жидким азотом. При замораживании спермы к ней всегда добавляют вещества, обладающие криозащитными свойствами: желток куриного яйца (содержащий лецитин), глицерин, хелатон, диметилсульфоксид, лактозу и др. Замороженную сперму (в гранулах, соломинках-капиллярах, пайеттах, алюминиевых пакетах, тубах и др.) перевозят в сосудах Дьюара с жидким азотом (при температуре минус 196 °С), в них же хранят сперму на пунктах искусственного осеменения. При транспортировании (всеми видами транспорта) эти сосуды необходимо тщательно закреплять (не допускать падения).

 

                     Техника искусственного осеменения самок животных

 

  Для осеменения самок используют сперму высокого качества как в биологическом, так и в ветеринарно-санитарном отношении. Один из самых сложных этапов в работе по искусственному осеменению животных — правильный выбор времени осеменения их в период половой охоты.

Осеменение  коров (телок). Их осеменяют двукратно в одну охоту: первый раз — сразу после выявления охоты, а второй — через 10—12 ч. Сперму вводят в канал шейки матки. Объем вводимой спермы должен составлять 0,25—1 мл или устанавливается станцией искусственного осеменения (рис.).