Тысячелистник лекарственный

Объем декалина вычитают из объема раствора масла в декалине и вычисляют содержание эфирного масла в объемно-весовых процентах (X) по отношению к воздушно-сухому сырью по формуле:

где в -объем раствора масла в декалине в миллилитрах;

г - объем декалина в миллилитрах;

б - навеска сырья в граммах.

 

Метод 2. Для определения эфирного масла используют прибор, изображенный на рис. 3.1.

Рис. 3.1 Прибор для определения содержания эфирного масла методами 2 и 3.

а - круглодонная колба; б - паропроводная изогнутая трубка; в - холодильник; г - градуированная трубка приемника; д - спускной кран; е - сливная трубка; ж - расширение; з - боковая трубка; и - резиновая трубка; к - воронка.

 

Прибор для определения эфирного масла состоит из круглодонной колбы объемом 1 л, паропроводной изогнутой трубки, холодильника, градуированной трубки приемника, которая заканчивается внизу спускным краном, и сливной трубкой.

В верхней части приемника имеется расширение с боковой трубкой, через которую вносится растворитель эфирного масла в дистиллят и сообщения внутренней части прибора с атмосферой. Колба и паропроводная трубка соединяются через нормальный шлиф. Градуированная трубка имеет цену деления 0,02 мл. Для заполнения прибора водой используется резиновая трубка с внутренним диаметром 4,5-5 мм, длиной 450 мм и воронка, диаметром 30-40 мм.

В течение 20 мин перед каждым определением через прибор пропускают пар. После 6-8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном и водой.

Допускается применение такого же разборного прибора, у которого паропроводная трубка сочленена с холодильником через нормальный шлиф, а сливная трубка заменена каучуковой.

Навеску измельченного сырья помещают в колбу, приливают 300 мл воды, колбу соединяют с паропроводной трубкой и заполняют водой градуированную и сливную трубки через кран при помощи резиновой трубки, оканчивающейся воронкой. Колбу с содержимым нагревают и кипятят с интенсивностью, при которой скорость стекания дистиллята составляет 60-65 капель в 1 мин в течение времени, указанного в соответствующей нормативно-технической документации на лекарственное растительное сырье.

Через 5 мин после окончания перегонки открывают кран, постепенно спуская дистиллят так, чтобы эфирное масло заняло градуированную часть трубки приемника, и еще через 5 мин замеряют объем эфирного масла.

Содержание эфирного масла в объемно-весовых процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

 

где V - объем эфирного масла в миллилитрах;

т - масса сырья в граммах;

W -потеря в массе при высушивании сырья в процентах [2, 3].

 

Собранное сырье тысячелистника анализируют в воздушно-сухом, свежем и свежезамороженном виде.

Для анализа химического состава берут соцветия Achillea millefolium L, исключая верхушечные листья и отцветшие цветки.

Эфирное масло получают модифицированным методом гидродистилляции, с последующей экстракцией петролейным эфиром [3].

Для перегонки берут стандартные количества образцов 100–150 г. Длительность перегонки составляла 3 ч. Полученное таким образом эфирное масло имеет характерный голубой цвет, который обусловлен большим содержанием хамазулена. Экстракт сушат сульфатом натрия и анализируют методом газожидкостной хроматографии с массспектрометрическим детектором (GC-MS). Идентификация соединений, зафиксированных хроматографически, проводится по библиотекам массспектров NIST и Wily 0.5.

Препаративное разделение эфирного масла на узкие фракции проводят методом колоночной хроматографии на силикагеле с петролейным эфиром в качестве элюента.

Анализ эфирного масла проводится на хроматомассспектрометре Saturn 2000 с газовым хроматографом Varian 3900 со стандартной ионизацией электронным ударом. В качестве газоносителя использовался особенно чистый гелий.

Группа соединений, которая химически диагностируется в тысячелистнике представлена тремя соединениями: кариофилленом (I), гермакреном (II) и хамазуленом(III), которые и можно считать хемотаксоном тысячелистника обыкновенного (схема).

Хамазулен, который является норсесквитерпеном, в нативном виде в растении не содержится. Образуется он в ходе гидродистиляции как результат термического разложения ахиллицина (IV) и матрицина (V), присутствие которых в экстрактах тысячелистника было установлено [7], и им подобных, т.е. тех, которые могут образовать ароматическую систему азулена элиминированием фрагментов воды, углекислоты и карбоновой кислоты [14].

Хамазулен замечателен еще тем, что, обладая высоко интенсивной голубой окраской (lmax =595 нм, e~ 33000), и всегда заметен визуально даже в незначительных концентрациях.

Высокая характеристичность образования хамазулена при гидродистилляции, т.е. при термолизе, сырья тысячелистника обыкновенного объясняется его термодинамической выгодностью и наличием набора функциональных групп (лактонного цикла как обязательного), обеспечивающих формирование ароматической системы азулена синхронным элиминированием соответствующих молекулярных фрагментов.

Подтверждением тому служат указания на то, что в эфирных маслах, полученных таким способом, не обнаружено норсесквитерпенов гермакренового и кадиненового рядов, хотя соответствующие лактоны (балханолид, миллефин и миллефолид) в экстрактах тысячелистника обыкновенного найдены. Также следует заключить о невозможности участвовать в образовании хамазулена имеющихся в его экстрактах гваянолидовых лактонов с кетонной групп – пой в циклопентановом цикле или без гидроксильной группы в циклогептановом цикле (ахиллин, матрикарин и леукомизин) –  не обеспечивается элиминирование фрагмента воды.

 

 

ВЫВОДЫ

 

1. Одним из известных лекарственных растений, применяемых как в научной, так и в народной медицине, является тысячелистник обыкновенный Achillea millefolium L., который относится к семейству сложноцветных и в период цветения образует белые соцветия, собранные в щитке на верхушке жесткого прямого стебля. Распространен повсеместное, кроме северных районов и пустынных мест. Встречается преимущественно в лесных районах на луках, лесных лужайках, опушках, возле дорог, в садах по всей территории Европейской части России.

2. Цельным лекарственным сырьем тысячелистника обыкновенного являются цельные или частично измельченные цветоносные побеги. Измельченным сырьем являются кусочки корзинок, отдельных цветков, листьев, стеблей различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Диагностическое значение имеют многочисленные простые волоски листьев растения с извилистыми конечными клетками; также важным признаком является присутствие эфирномасличных желёзок.

3. Государственная Фармакопея  четко регламентирует состав  сырья тысячелистника обыкновенного  по внешним признакам и микроскопическим  характеристикам. В качестве метода  количественного определения используют  отгонку эфирного масла, которое у тысячелистника имеет характерный голубой цвет благодаря содержанию в нем хамазулена. Количественное определение других действующих веществ в самом сырье и эфирном масле ГФ не регламентировано. В фармакопеях других стран производится как качественное, так и количественное определение характерных компонентов методами тонкослойной хроматографии, фотоколориметрии, жидкостной хроматографии.

 

 

 

ЛИТЕРАТУРА

 

1. Государственная фармакопея Российской Федерации ХII. Ч. 1./ Издательство научный центр средств медицинского применения, 2008. – 704 с.
2. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа. ХI изд. – М.: Медицина. 1987. – 335 с.
3. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. ХI изд. – М.: Медицина. 1989. – 400 с.
4. Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». - 1-е вид. - Доповнення 2. - Харків: 2008. - 620 с.
5. Державна Фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний фармакопейний центр». - 1-е вид. - Доповнення 3. - Харків: 2009. - 280 с.
6. European Pharmacopoeia 6.0, vol. 1 / Европейская фармакопея 6.0, Том 1. - Страсбург: Council of Europe, Strasbourg, 2007. — 1129 с.

7. Ковалев В.Н., Попова Н.В., Кисличенко В.С. и др. Практикум по фармакогнозии. – Харьков, изд-во НфаУ «Золотые страницы» «МКТ – Книга», 2004. – 512 с.

8. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: Учебное пособие / под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. - СПб.: СпецЛит, 2004. - 765 с.
9. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Ч. 1. - М.: Медицина, 1977. - 304 с.
10. Муравьева Д. А., Самылина И. А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия. - М.: Медицина, 2002. – 658 с.
11. Палей Р.В., Племенков В.В., Артемов Н.П., Чугунов Ю.В., Фазлыева М.Г. Химический состав эфирного масла Achillea millefolium L., полученного методом гидродистилляции // Растительные ресурсы . 1996. Т. 32. Вып. 4. С . 37–44
12. Тихонов А. И., Ярных Т. Г. Технология лекарств: Учеб. для фармац. вузов и фак.: Пер. с укр. / Под ред. А. И. Тихонова.— Х.: Изд-во НФАУ; Золотые страницы, 2002.— 704 с.
13. Фармакогнозія. Бобкова І.А., Варлахова Л.В., Маньковська М.М. / Підручник - К.: Медицина, 2006. 440 с.
14. Юсубов М.С., Калинкина Г. И., Дрыгунова Л.А., Покровский Л.М., Королюк Е.А., Ткачев А.В. Химический состав эфирного масла тысячелистников обыкновенного (Achellea MillefoliumL.) азиатского (Achellea Asiatica Serg.) // Химия растительного сырья.  2000. - № 3. С. 25–32.