Государственный медицинский
университет г. Семей
Тема: Инфектология как наука
и место в ней микробиологии. Микроскопические
методы. Характеристика инфекционного
процесса. Патогенность и токсигенность
бактерий. Инфекционость вирусов.
Выполнил: Аужанов А.К. группа ОМФ-233
Проверила: Рахимжанова Б.К
СРС
Кафедра:
Молекулярной биологии с микробиологией.
Дисциплина:
Микробиология
г.Семей
2012г
План:
- 1.Понятие о инфектологии;
- 2.Микроскопические методы исследования;
- 3.Характеристика инфекционного процесса;
- 4.Патогенность и токсигенность бактерий;
- 5.Инфекционость вирусов;
- 6.Заключение.
- 7.Литература.
Инфектология - наука,
изучающая инфекционный процесс, инфекционную
болезнь, инфекционную патологию, возникающую
в результате конкурентного взаимодействия
организма человека с патогенными или
условно-патогенными микроорганизмами,
и разрабатывающая методы диагностики,
лечения и профилактики инфекционных
болезней.
МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ - способы изучения очень
мелких, неразличимых невооруженным глазом
объектов с помощью микроскопов. Широко
применяются в бактериологических, гистологических,
цитологических, гематологических и других
исследованиях (см. Бактериологическое
исследование, Гистологические методы
исследования, Кровь, Микроскоп, Цитологическая
диагностика).
- Одним из главных микроскопических методов исследования является световая микроскопия. Световая микроскопия предназначена для изучения окрашенных препаратов на предметных стеклах. С помощью световой микроскопии можно исследовать подвижность микроорганизмов. Для этого применяют метод висячей капли. Небольшую каплю микробной взвеси наносят на середину покровного стекла. Предметное стекло с углублением ("лункой"), края которого смазаны вазелином, осторожно накладывают на покровное стекло так, чтобы капля исследуемой жидкости оказалась в центре углубления, плотно прижимают к стеклу и быстро переворачивают кверху. Для исследования препарата используют иммерсионный объектив, который погружают в иммерсионное масло на покровном стекле.
Фазово-контрастная
микроскопия:
- Фазово-контрастная микроскопия основана на интерференции света: прозрачные объекты, отличающиеся по показателю преломления от окружающей среды, выглядят либо как темные на светлом фоне (позитивный контраст), либо как светлые на темном фоне (негативный контраст). Фазово-контрастная микроскопия применяется для изучения живых микроорганизмов и клеток в культуре ткани.
Темнопольная микроскопия:
- Темнопольная микроскопия (ультрамикроскопия) основана на рассеянии света микроскопическими объектами (в том числе теми, размеры которых меньше предела разрешения светового микроскопа). При темнопольной микроскопии в объектив попадают только лучи света, рассеянного объектами при боковом освещении (аналогично эффекту Тиндаля, примером которого является обнаружение пылинок в воздухе при освещении узким лучом солнечного света). Прямые лучи от осветителя в объектив не попадают. Объекты при темнопольной микроскопии выглядят ярко светящимися на темном фоне. Применяется темнопольная микроскопия преимущественно для изучения спирохет и обнаружения (но не изучения морфологии) крупных вирусов.
Люминесцентная микроскопия:
- В основе люминесцентной микроскопии лежит явление люминесценции, т. е. способности некоторых веществ светиться при облучении их коротковолновой (сине-фиолетовой) частью видимого света либо ультрафиолетовыми лучами с длиной волны, близкой к видимому свету. Люминесцентная микроскопия используется в диагностических целях для наблюдения живых или фиксированных микроорганизмов, окрашенных люминесцирующими красителями (флюорохромами) в очень больших разведениях, а также при выявлении различных антигенов и антител с помощью иммунофлюоресцентного метода.
- Поляризационная микроскопия основана на явлении поляризации света и предназначена для выявления объектов, вращающих плоскость поляризации. Применяется в основном для изучения митоза.
- Электронная микроскопия принципиально отличается от световой как устройством электронного микроскопа, так и его возможностями. В электронном микроскопе вместо световых лучей для построения изображения используется поток электронов в глубоком вакууме. В качестве линз, фокусирующих электроны, служит магнитное поле, создаваемое электромагнитными катушками. Изображение в электронном микроскопе наблюдают на флюоресцирующем экране и фотографируют. В качестве объектов используют ультратонкие срезы микроорганизмов или тканей толщиной 20- 50 нм, что значительно меньше толщины вирусных частиц. Высокая разрешающая способность современных электронных микроскопов позволяет получить полезное увеличение в миллионы раз. С помощью электронного микроскопа изучают ультратонкое строение микроорганизмов и тканей, а также проводят иммунную электронную микроскопию.
- Инфекционный процесс - это комплекс взаимных приспособительных реакций на внедрение и размножение патогенного микроорганизма в макроорганизме, направленный на восстановление нарушенного гомеостаза и биологического равновесия с окружающей средой. Инфекционный процесс составляет основу развития инфекционных заболеваний. Как известно, к числу возбудителей инфекционных болезней относятся микроорганизмы растительного и инфекционного происхождения – бактерии, спирохеты, низшие грибы, простейшие, вирусы, риккетсии. Инфекционные агенты являются первичной и обязательной причиной развития инфекционной болезни, они определяют «специфику» инфекционного заболевания, особенности клинических проявлений патологии. Однако не каждый случай проникновения инфекционного возбудителя в организм заканчивается развитием болезни.
Этапы
развития инфекционного процесса:
- Начальный этап – преодоление естественных барьеров организма хо-зяина: механического (кожа, слизистые, движение ресничек эпителия, пери-стальтика кишечника и др. ); химического (бактерицидное действие желу-дочного сока, желчных кислот, лизоцима, антител); экологического (антаго-нистической активности нормальной микрофлоры).
- Проникновение микроорганизма в макроорганизм обозначается как инфективность. Факторами распространения инфекционных возбудителей во внутренней среде организма являются: ферменты (гиалуронидаза, коллагена-за, нейроминидаза); жгутики (у холерного вибриона, кишечной палочки, про-тея); ундулирующая мембрана (у спирохет и некоторых простейших).
- Следующий этап в развитии инфекционного процесса связан с адгезией и колонизацией возбудителем открытых полостей организма. Факторы адгезии и колонизации обеспечивают взаимодействие инфекционного патогенного агента со специфическими рецепторами клеток тех органов и тканей, к кото-рым обнаруживается тропизм. Адгезивные молекулы представляют собой вещества белковой и полисахаридной природы, экспрессируемые на поверх-ности клеток. Вслед за адгезией неизменно возникают размножение и обра-зование большого количества однородных микробов (колоний) в случае не-достаточности местных и системных механизмов резистентности и специфи-ческих иммунологических механизмов защиты.
- Интервал времени от инфицирования организма до появления первых клинических признаков болезни, получил название инкубационного периода.
- Инкубационный период характеризуется не только размножением и селективным размножением микроорганизмов в тех или иных органах и тканях, но и мобилизацией защитных сил организма. Длительность инкубационного периода определяется биологическими особенностями возбудителей, составляет от нескольких часов (ботулизм, кишечные инфекции), нескольких дней, нескольких недель, до нескольких лет (лепра, СПИД).
- ПАТОГЕННОСТЬ - видовое свойство возбудителя, характеризующее его способность размножаться и вызывать те или иные патологические изменения в организме без дополнительной адаптации. В вирусологии понятие патогенность относится к типу вируса и означает, что данное свойство представлено у всех штаммов (изолятов) этого типа. Понятию патогенность не противоречит тот факт, что высокоаттенуированные штаммы практически утратили многие отличительные черты своего типа, т. е. оказались лишенными способности к патологическому воздействию на организм хозяина. Патогенность обычно описывается только качественными признаками
- Токсины
[от трем,
toxikon, яд] — важнейшие факторы патогенности, вырабатываемые микроорганизмами и реализующие основные механизмы инфекционного процесса.
Токсины облегчают первичную
колонизацию и вызывают системные
поражения, характеризующие специфические
проявления той или иной инфекционной
болезни.
- У вирусов прежде всего определяют инфекционность. Количество инфекционного вируса в данной суспензии можно «оттитровать», заражая культуру клеток, куриные эмбрионы или лабораторных животных вирусной суспензией в различных разведениях, и затем в течение нескольких дней наблюдать за появлением признаков, свидетельствующих о размножении вируса. Хорошо известным примером определения такого типа может служить подсчет колоний, образованных бактериями на чашке с агаром. Каждый жизнеспособный микроорганизм, размножаясь, образует дискретный клон; следовательно, подсчитывая колонии, мы непосредственно определяем исходное число бактерий. Подобные же методы в вирусологии основаны на подсчете локальных повреждений (оспин) на хорионе куриного эмбриона или стерильных пятен (бляшек) на монослое культуры клеток.
- Метод бляшек. Дульбекко (1952), а также Фогт (1954) модифицировали метод количественного определения бактериофагов по числу стерильных пятен и применили его для вирусов животных. В настоящее время этот метод количественного определения вирусов животных наиболее широко распространен. Суспензию, содержащую вирус, помещают на клеточный монослой и оставляют примерно на час, с тем чтобы вирионы прикрепились к клеткам; затем жидкость замещают плотным гелем, который ограничивает распространение дочерних вирусных частиц, так что ими могут быть заражены только клетки, соседние с первоначально инфицированными. Таким образом, каждая инфекционная частица дает локальное скопление зараженных клеток, которое через несколько дней становится настолько большим, что его можно видеть невооруженным глазом.
- Для получения геля, которым покрывают клетки, используют весьма разнообразные вещества, в том числе агар, метилцеллюлозу, трагакант, крахмал. Наиболее часто употребляют агар, однако недостатком агарового геля является присутствие в нем сульфополисахаридов, подавляющих рост некоторых вирусов. Подавляющее действие полисахаридов можно нейтрализовать, добавив в гель ДЕАЕ-декстран. Обязательным компонентом геля должна быть питательная среда, необходимая для поддержания клеток в жизнеспособном состоянии.
- После инкубационного периода продолжительностью от 2 дней до 4 недель в зависимости от изучаемого вируса клеточный монослой окрашивают каким-либо прижизненным красителем, например нейтральным красным или тетразолием. Живые клетки адсорбируют краситель, и бляшки выглядят как светлые пятна на красном фоне. Вирусы, которые не обладают свойством разрушать клетки, можно оттитровать сходным образом, выявляя бляшки с помощью гемадсорбции, интерференции или флуоресцирующих антител. Некоторые вирусы, например герпесвирусы и поксвирусы, способны образовывать бляшки в монослое даже без плотного покрытия. Это объясняется тем, что большая часть вновь образованных вирусных частиц остается связанной с клетками и бляшки образуются путем распространения вируса из клетки в клетку через межклеточные мостики.
Заключение
Инфектология - наука, изучающая инфекционный
процесс, инфекционную болезнь, инфекционную
патологию, возникающую в результате конкурентного
взаимодействия организма человека с
патогенными или условно-патогенными
микроорганизмами, и разрабатывающая
методы диагностики, лечения и профилактики
инфекционных болезней.
Инфекционность – это свойство паразитического
микроорганизма выживать в организме
хозяина, преодолевая неспецифичные защитные
механизмы (напр., фагоцитоз).
- Список использованной литературы:
- 1.Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология:
- Учебник/Л.Б. Борисов. - М.:Мединформ, 2005.-736 с.
- 2.Воробьев А.А., Кривошейн Ю.С., Широбоков В.П. Медицинская и санитарная микробиология М: Издательский центр "Академия" 2003, 464 с.
- 3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология // С-Петербург: Специальная литература, 2002, 580 с.
- 4..Микробиология / Воробьев А.А., Быков А.С., Пашков Е.П., Рыбакова А.М. / М., Медицина, 2002.
- 5.Микробиология/ Тимаков В.Д., Левашов В.С., Борисов Л.Б./ М., Медицина, 1986
- 6.Микробиология/ Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С./ М., Медицина, 1980
- 7.Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии/ под ред. Борисова Л.Б.,/ М., Медицина, 1979
- 8.Микробиология / Поздеев О.К.// Под ред. В.И. Покровского // М. ГЭОТАР Медиа, 2010. – 768 стр.