Фармакотехнологические исследования по разработке и изучению стабильности лекарственных форм с азитромицином

Воды очищенной (ФС 42-2619-97)  до 100 мл

Рисунок 4 – Технологическая схема производства геля с азитромицином

Примечание – ВР - стадии вспомогательных работ; ТП - стадии основного технологического процесса; УМО - стадии упаковки, маркировки; Кт, Кх, Кб - контроль технологический, контроль химический и контроль биологический.  

ГЛАВА 5 Оценка качества и стабильности лекарственных форм азитромицина локального действия

Важным в исследовании лекарственных препаратов является наличие точной и высокочувствительной методики количественного определения лекарственного вещества. Для количественного определения азитромицина в суппозиториях и гелях адаптирована методика ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектированием при длине волны 210 нм. Исследования проводили на жидкостном хроматографе «GILSON», колонка NSRgelOD-2 PW. В качестве подвижной фазы использовали 0,05 М раствор калия фосфата двузамещенного в смеси вода : ацетонитрил (9:11), скорость ее потока - 0,5 мл/мин. Последовательно хроматографировали по 25 мкл испытуемого раствора, полученного из лекарственной формы, и раствора государственного стандартного образца азитромицина. Время выхода пика азитромицина около 9 минут. Проведена валидация разработанной методики количественного определения по показателям: специфичность, линейность, правильность, сходимость, диапазон аналитического метода (таблица 3).

Таблица 3 – Результаты валидационной оценки методики количественного определения азитромицина методом ВЭЖХ

Для идентификации азитромицина предложена методика ТСХ на пластинах «Sorbfil», с использованием систем хлороформ – ацетон – аммиака раствор концентрированный 25 % (1:5:0,5) и хлороформ – этанол – аммиака раствор концентрированный 25 % (1:1:0,5). Значения коэффициентов подвижности Rf азитромицина в указанных системах составили 0,83±0,02 и 0,79±0,02, соответственно. Чувствительность методики определения – 2 мкг азитромицина.

Полученные методом выливания на двух основах суппозитории оценивали по требованиям нормативной документации: суппозитории однородные, белого (на витепсоле) или белого с желтоватым оттенком (на бутироле) цвета, торпедовидной формы, без механических включений, средней массой 1,5 г ± 5 %, с размером частиц азитромицина не более 10 мкм. Температура плавления суппозиториев на бутироле – (35,5±0,5) ºС, на витепсоле – (36,4±0,5) ºС; время полной деформации – 10,0±1,0 мин и 11,0±2,0 мин; значение рН водной вытяжки – 6,0-6,8 и 6,5-7,2, соответственно. Содержание азитромицина в суппозиториях на основе бутирол и витепсол находится в пределах 96,77 % - 99,01 % и 96,75 % - 100,17 %, соответственно. Подлинность азитромицина подтверждается методами ВЭЖХ и ТСХ по соответствию времени выхода и значению Rf исследуемых образцов стандарту. При использовании прибора «Вращающаяся корзинка» (тест «Растворение») – за 45 мин из суппозиториев на основе бутирол в среду растворения (0,05 М раствор калия фосфата двузамещенного в смеси ацетонитрил : вода 11:9 объемом 500 мл) переходит не менее 75 % азитромицина, из суппозиториев на основе витепсол – не менее 80 %. Суппозитории обладают антибактериальной активностью в отношении исследуемых тест-штаммов микроорганизмов, их микробиологическая чистота соответствует требованиям ГФ XII изд.

Установлено, что в процессе хранения суппозиториев в течение 30 мес (срок наблюдения) все показатели качества соответствовали нормативу.

Для оценки геля азитромицина его фасовали по 10 г в алюминиевые тубы с лаковым покрытием и исследовали стабильность в процессе хранения при температуре (5±3) °С. Полученный гель представляет собой однородную, полупрозрачную массу белого цвета без запаха. Значение рН водного 10 % раствора 6,6 - 7,4, размер частиц азитромицина не превышает 10 мкм. Гель термо- и коллоидностабилен. Количественное содержание находится в пределах 97,02 % - 100,02 %. Подлинность подтверждена методами ВЭЖХ и ТСХ. Гель обладает антибактериальной активностью, по микробиологической чистоте соответствует требованиям ГФ XII изд. Указанные характеристики соответствовали нормируемым требованиям в течение всего срока наблюдения (30 мес), что свидетельствует о стабильности разработанного геля.

Заключение

Основные итоги выполненного диссертационного исследования сводятся к следующим основным положениям:

1. На основании биофармацевтических исследований и изучения технологических параметров разработаны состав и технология суппозиториев с противомикробным препаратом группы макролидов – азитромицином для лечения урогенитальных инфекционных заболеваний. Для суппозиториев промышленного производства рекомендована основа витепсол Н-15, экстемпорального изготовления – бутирол.
2. На основании комплексных исследований разработан состав и технология геля с азитромицином, обладающего широким спектром противомикробной активности, предназначенного для интравагинального применения. В качестве основы геля предложена композиция МЦ с добавлением глицерина.
3. По результатам изучения высвобождения азитромицина из состава лекарственных форм, полученных методами диализа через мембрану и диффузии в агаровый гель с тест-микроорганизмами, доказана целесообразность введения ПАВ: в состав суппозиториев на основе витепсол – твина-80, на основе бутирол – эмульгатора Т-2, в состав геля – твина-80. Микробиологическая стабильность препаратов обеспечена добавлением консервантов нипагина и нипазола в соотношении (3:1).
4. Разработана методика количественного анализа азитромицина в суппозиториях и геле с использованием метода ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектированием при длине волны 210±2 нм. Относительная ошибка определения в суппозиториях на основе витепсол составила 1,74 %, на основе бутирол – 1,15 %, в геле на основе МЦ – 1,53 %.
5. Для качественного анализа разработанных суппозиториев и геля, а также подтверждения их стабильности предложена методика тонкослойной хроматографии, с использованием двух систем растворителей: хлороформ – ацетон – аммиака раствор концентрированный 25 % (1:5:0,5) и хлороформ – спирт этиловый – аммиака раствор концентрированный 25 % (1:1:0,5).
6. По показателям нормативной документации осуществлена оценка качества и изучена стабильность суппозиториев и геля с азитромицином. Установлено соответствие разработанных лекарственных препаратов нормативным требованиям и их стабильность в процессе хранения, что позволило установить сроки годности суппозиториев и геля – 2 года и рекомендации к их хранению – при температуре (5±3) °С.
7. На разработанные лекарственные формы подготовлена нормативная документация: проект ФСП «Азитромицина суппозитории вагинальные на витепсоле Н-15, 200 мг» и лабораторный регламент производства суппозиториев с азитромицином на витепсоле Н-15.

Результаты данного диссертационного исследования могут быть рекомендованы для использования в фармацевтической и медицинской практике с целью расширения ассортимента лекарственных препаратов антимикробного действия для местного применения.

Перспективы дальнейшей разработки темы диссертационного исследования заключаются в совершенствовании технологической схемы производства, разработка на ее основе опытно-промышленного регламента и продолжении внедрения предложенных лекарственных препаратов азитромицина.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Кедров, С.И. Применение азитромицина в терапии инфекционных урогенитальных заболеваний / С.И. Кедров, Т.А. Бредихина // Теория и практика фармации : сборник научных статей, посвященный 90-летию ВГМА им. Н.Н. Бурденко. – Воронеж, 2009. – С. 114 - 117. 
2. Бредихина, Т.А. Влияние измельченности азитромицина на его высвобождение из суппозиториев / Т.А. Бредихина, С.С. Пашенцева // Материалы V Всероссийской Бурденковской студенческой научной конференции. – Воронеж, 2009. –Том II. – С. 994 - 996.
3. Бредихина, Т.А. Изучение совместимости компонентов в разрабатываемых суппозиториях методом тонкослойной хроматографии / Т.А. Бредихина, Т.А. Панкрушева, С.И. Кедров // Биотехнология. Биомедицинская инженерия и технология современных социальных практик : сборник трудов Всероссийской научно-практической конференции. – Курск, 2009. – С. 109 - 111.
4. Панкрушева, Т.А. Разработка офтальмологического геля с азитромицином / Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина // «Современные наукоемкие лечебные и фармацевтические технологии для офтальмологии» для молодых ученых» : сборник материалов Всероссийской школы-семинара. – Белгород, 2009. – С. 100 - 103.
5. Бредихина, Т.А. Хроматографическое определение азитромицина в разрабатываемых лекарственных формах для местного применения / Т.А. Бредихина // Вестник молодежного инновационного центра. – Воронеж, 2009. – Выпуск II. – С. 6-8.
6. Бредихина, Т.А. Разработка и исследование вагинальных суппозиториев с азитромицином / Т.А. Бредихина // Материалы IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков. – Курск, 2010. – Том I. – С. 172 - 174.
7. Бредихина, Т.А. Спектрофотометрическое определение азитромицина в лекарственных формах для местного применения / Т.А. Бредихина, Т.А. Панкрушева // Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Поиск новых физиологически активных веществ : материалы 4-й Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование – 2010». – Воронеж, 2010. – Часть II. – С. 73 - 74.
8. Бредихина, Т.А. Выбор основообразующей композиции для суппозиториев с азитромицином / Т.А. Бредихина, С.С. Пашенцева // Материалы VI Всероссийской Бурденковской студенческой научной конференции, посвященной 65-летию Победы в Великой Отечественной войне. – Воронеж, 2010. – Том I. – С. 469 - 471.
9. Бредихина, Т.А. Разработка и анализ суппозиториев антимикробного действия, содержащих азитромицин / Т.А. Бредихина, Т.А. Панкрушева, О.А. Медведева // Человек и лекарство : сборник материалов конгресса (тезисы докладов). – Москва, 2010. – С. 585.
10. Панкрушева, Т.А. Оценка качества разработанных суппозиториев с азитромицином // Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина // Разработка исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сборник научных трудов. – Пятигорск, 2011. – С. 438 - 439.
11. Бредихина, Т.А. Влияние дисперсности азитромицина на его высвобождение из лекарственных форм локального действия / Т.А. Бредихина, Д.В. Василенко, Т.А. Панкрушева // Современные аспекты разработки и совершенствования состава и технологии лекарственных форм : сборник научных трудов. – Курск, 2011. – С. 36 - 39.
12. Панкрушева, Т.А. Исследования по разработке интравагинальных суппозиториев с азитромицином для лечения урогенитальных инфекционных заболеваний / Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина, О.А. Медведева // Забайкальский медицинский вестник. – 2011. – № 2. – С. 146 - 155.
13. Бредихина, Т.А. Разработка хроматографической методики  анализа азитромицина и ее использование при оценке качества и стабильности лекарственных форм локального действия / Т.А. Бредихина, Т.А. Панкрушева // Научные ведомости Белгородского государственного университета. – 2011. – № 22 (117). – Выпуск 16/2. – С. 195 - 199.
14. Разработка геля с азитромицином для лечения урогенитальных инфекционных заболеваний / Т.А. Бредихина [и др.] // Вестник новых медицинских технологий. – 2011. – Том XVIII, № 4. – С. 177 – 179.
15. Панкрушева, Т.А. Микробиологические исследования при разработке геля с азитромицином / Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина, О.А. Медведева // Традиции и инновации фармацевтической науки и практики : материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной 45-летию фармацевтического факультета КГМУ. – Курск, 2011. – С. 231 – 233.
16. Биофармацевтические исследования при разработке технологии лекарственных форм азитромицина локального действия / Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина [и др.] // Биофармацевтические особенности создания лекарственных препаратов в аспекте их медицинского использования : материалы научно-практической интернет-конференции. – Харьков, 2011. – С. 30.
17. Панкрушева, Т.А. Изучение стабильности суппозиториев с азитромицином / Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина // Человек и лекарство : сборник материалов конгресса (тезисы докладов). – Москва, 2012. – С. 410.
18. Панкрушева, Т.А. Биофармацевтические аспекты изучения влияния поверхностно-активных веществ на качество разработанного геля с азитромицином / Т.А. Панкрушева, Т.А. Бредихина // Разработка исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : сборник научных трудов. – Пятигорск, 2012. – С. 186 – 188.
19. Бредихина, Т.А. Биофармацевтические исследования при разработке суппозиториев с азитромицином / Т.А. Бредихина, Т.А. Панкрушева // Актуальные проблемы фармацевтической науки и практики : материалы Всероссийской научно-практической конференции. – Владикавказ. – 2013. – С. 237 - 243.