Спектрофотометрія

Міністерство  освіти і науки

Донецький національний університет

Біологічний факультет

Кафедра біофізики

 

 

 

 

 

Лабораторна робота

на тему:

«Спектрофотометрія»

 

 

 

Виконав:

студент 3 курсу групи Б

Зощенко О.

 

 

 

 

 

 

Донецьк 2013

 

Частина 1

• Виміряйте інтенсивність світла, що проходить через бланк.
• Виміряйте інтенсивність світла, що проходить через зразок.
• Розрахуйте коефіцієнт пропускання.
• Розрахуйте абсорбцію.

T =  I/I₀

A  = - log T

Бланк:

І₀ = 37,53 ф/с

Зразок: 
І= 24,48 ф/с

Т= 0,65

А= 0,19

 

Частина 2

• Визначити спектр поглинання розчину
• Визначити довжину хвилі максимального поглинання

 

Ч. 2.1

Макс. Довжина  хвилі для цього зразка = 563 нм

І₀=300 ф/с

 

Довжина хвилі	І	Т	А
380	281	0.94	0.02
410	249	0.83	0.08
440	193	0.64	0.19
470	129	0.43	0.37
500	79	0.26	0.59
530	50	0.17	0.77
560	40	0.13	0.88
590	47	0.16	0.80
620	72	0.24	0.62
650	118	0.39	0.41
680	180	0.60	0.22
710	238	0.79	0.10
740	275	0.92	0.03
780	293	0.98	0.009

 

 

Ч. 2.2

 

Для невідомого зразка:

І₀=300 ф/с

Довжина хвилі	І	Т	А
380	291	0.97	0.01
410	276	0.92	0.03
440	250	0.83	0.08
470	224	0.75	0.12
500	193	0.64	0.19
530	167	0.56	0.25
560	146	0.49	0.3
590	132	0.44	0.36
620	101	0.34	0.47
650	58	0.19	0.72
680	56	0.18	0.74
710	116	0.39	0.4
740	230	0.77	0.11
780	294	0.98	0.009

 

 

Частина 3

Вплив довжини  зразка.

І = 300

 

l зразка (см)	І (фот/сек)	Т (%)	А
1	189	64	0.2
2	121	40	0.4
3	75	25	0.6
4	49	16	0.8
5	30	10	1.0

 

Відповіді: 
1. Чим більша довжина зразка, тим менша інтенсивність. Тому що, чим більший зразок, тим більше фотонів поглинається. 
2. Чим більша довжина зразка, тим менший коефіцієнт пропускання. 
3. Чим більша довжина зразка, тим більший коефіцієнт поглинання. 

Частина 4

Вплив концентрації

Іо = 500

 

С (mole L^-1)	I (фот/сек)	Т (%)	А
0.001	316	63	0.2
0.002	197	40	0.4
0.003	124	25	0.6
0.004	78	16	0.8
0.005	49	10	1.0

 

Відповіді: 
1. Чим більша концентрація, тим менша інтенсивність. Розчин з більшою концентрацією поглинає більше фотонів. 
2. Чим більша концентрація, тим менший коефіцієнт пропускання. 
3. Чим більша концентрація, тим більший коефіцієнт поглинання. 

Частина 5

Молярний коефіцієнт поглинання для досліджуваної речовини.

Іо = 542

 

С (мкмоль L^-1)	І	Т	А
13.7	365	0.67	0.17
27.4	244	0.45	0.35
41.1	160	0.30	0.52
54.8	109	0.20	0.70

 

 

Частина 6

Визначення  концентрації невідомої речовини за допомогою калібрувального графіка.

 

Іо = 663

 

С (кмоль L^-1)	Т	А
20	0.58	0.23
40	0.34	0.47
60	0.19	0.72
80	0.11	0.96
Х	0.23	0.64