Возбудитель Американского гнильца

Возбудитель Американского гнильца.

Возбудитель – Paenibacillus larvae subsp. larvae, тонкая с умеренно закругленными концами грамположительная палочка. Подвижна, перитрих, образует овальные центрально или термально расположенные эндоспоры, факультативный анаэроб. В мазках клетки возбудителя располагаются поодиночке, но нередко в виде длинных тонких нитей. Температурные границы роста 20…45 «С, оптимум 34…37 °С. В качестве добавок к питательным средам, содержащим ростовые вещества, используют экстракт личинок пчел, яичный желток с молоком или дрожжами и др. Paenibacillus larvae также хорошо растет на развивающихся куриных эмбрионах.

При росте  Paenibacillus larvae выделяет антибиотические вещества, препятствующие развитию грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов, но не действующие на кислотоустойчивые бактерии. Благодаря этой особенности другие микроорганизмы в погибших от американского гнильца личинках обычно не развиваются.

Споры возбудителя  американского гнильца очень  устойчивы во внешней среде, способны выживать многие годы в корме пчел, почве, сухих остатках погибших личинок. Из корочек личинок, хранящихся в запаянных ампулах, возбудитель выделяли через 75…89 лет. В растворе антибиотиков он был жизнеспособен в течение 35 лет.

Клинические признаки. В естественных условиях болезнь наблюдается на пасеках во второй половине июня, в  июле и августе. Все породы пчел одинаково  восприимчивы к американскому гнильцу. Инкубационный период составляет 3—7 дней. Внешние признаки болезни обнаруживают при осмотре пчелиных семей. В  начале заболевания отмечают поражение  единичных личинок, расположенных  в разных местах. Со временем число  их увеличивается. На сотах, занятых  одновозрастным расплодом, встречаются  пустые ячейки, ячейки с яйцами и  погибшими личинками, что придает  расплоду пестрый вид. Заболевают обычно взрослые запечатанные личинки.

 Разлагающиеся трупы  личинок находятся на нижней  стенке ячейки и имеют вязкую  тягучую консистенцию, напоминающую  густой клей. Цвет личинок изменяется  от серовато-бел о го до темно-коричневого. Погибшие личинки приобретают характерный запах столярного клея. Восковые крышечки над погибшими личинками темнеют, западают и продырявливаются.

 

Западание крышечек объясняется  тем, что погибшие личинки высыхают, уменьшаются в размерах и тянут  за собой крышечку внутрь ячейки. Позднее  гнилостная масса высыхает и крепко прилипает к нижним стенкам ячеек  в виде темно-коричневых корочек, от которых пчелы не могут очистить ячейки. Удалить корочку из ячейки препаровальной иглой или пинцетом без разрушения стенки ячейки не удается. Матки не откладывают яйца в такие ячейки. В заболевших семьях снижается работоспособность пчел. Они становятся вялыми и быстро изнашиваются. При сильном поражении количество молодых пчел бывает небольшим или они вовсе отсутствуют, так как расплода гибнет больше, чем нарождается молодых пчел. Такая семья без оказания ей помощи погибает в конце лета, зимой или ранней весной.

 

Диагноз. Предварительный  диагноз ставят на основании характерных  признаков болезни. При осмотре  обращают внимание на возраст пораженного  расплода, цвет, консистенцию и запах  трупов личинок. Окончательный диагноз  ставят с учетом характерных клинических  признаков и результатов бактериоскопических, бактериологических и серологических исследований. Дифференциальный диагноз. Необходимо исключить парагнилец, европейский гнилец, порошковидный, мешотчатый и застуженный расплод, варрооз и тропилелапсоз. При европейском гнильце и порошковидном расплоде чаще поражается незапечатанный расплод. При поражении печатного расплода, а также при парагнильце крышечки над погибшими личинками чаще без изменений, характерных для американского гнильца. При мешотчатом расплоде погибшие личинки сильно отличаются от таковых при американском гнильце. Застуженный расплод ведет к гибели личинок сплошными участками на нижних частях сотов или на боковых рамках. При сложной эпизоотической обстановке следует иметь в виду, что часто семьи бывают одновременно поражены несколькими заразными болезнями.

Как происходит заражение Американским гнильцом

 

Как и при других заболеваниях, инфекция осложняется из-за побочных стрессовых условий, таких как: недостаток питания, воды, места, нападения других вредителей и наличия других заболеваний.

 

P. larvae subsp. larvae образует споры, устойчивые к сухости и антибиотикам. Каждая чешуйка, зараженная Американским гнильцом, будет содержать миллионы инфекционных спор.

 

Споры могут находиться в спячке в течение многих лет и даже десятков лет в улье, на рабочих  инструментах пчеловода, в меде или  воске.

 

Молодые пчелиные личинки заражаются спорами, которые уже находились в ячейке;  источником заражения для личинок  могут стать пчелы-уборщицы, а  также зараженная инфекцией пища расплода. При заглатывании спор Р. larvae вегетативные клетки прорастают в содержимом средней кишки в течение 24 ч. Они очень подвижны, мигрируя через перитрофи-ческую мембрану, проникают в эпителиальные клетки, вызывая их гибель. Как за счет фагоцитоза, так и самостоятельно возбудитель проникает в гемоцель насекомого, разносится по всему организму, где начинает интенсивно размножаться. Личинка, зараженная до периода окукливания, продолжает развиваться, плетет кокон, приступает к метаморфозу; в период покоя после плетения кокона, стадии предкуколки или куколки из-за бактериемии происходит распад тела, споруляция бактерий. Иногда гибель личинок и образование спор может наступить до запечатывания расплода. Возбудитель в погибшей личинке присутствует практически в чистой культуре.

Если не принимать меры, Американский гнилец стремительно распространяется внутри пчелосемьи, становясь причиной гибели большей части расплода. В конце сезона, как правило, это часто приводит к тому, что от пчелосемьи остается маленькая слабая группа пчел, которые могут не пережить зимовку.

 

Споры Американского гнильца могут  быстро распространиться на другие пчелосемьи, их переносят пчелы или нечаянно сами пчеловоды.

 

Ближе к окончанию сезона, споры  Американского гнильца могут  быть перенесены во время пчелиного  воровства: когда пчелы из сильных  здоровых ульев воруют слабые, зараженные пчелосемьи.

 

Рои пчел из зараженных пчелосемей могут  также переносить заболевания на новые территории.

 

На рисунке изображены соты с  зараженными и здоровыми личинками. Здоровые личинки развиваются в  куколки с черными глазами. Зараженные личинки мертвы и превращаются  в вязкую массу. Некоторые зараженные личинки пережили метаморфоз и превратились в зараженных куколок (обведена  в круг).

 Зараженная личинка (вязкая  стадия)

Течение и клиническое проявление

 

Инкубационный период обычно длится 9… 10 дней, изредка 2…3 дня. Заболевание протекает в  скрытой (бессимптомной) и явной  формах.

Обычно  бессимптомный период предшествует проявлению явных признаков. При скрытой форме возбудитель болезни обнаруживают у взрослых особей пчелиной семьи и в меде. Пчелы-кормилицы распознают заболевших личинок и удаляют их из расплода. В этот период может быть удалено до 50…90% больных особей. Основное изъятие приходится на возраст 0,5… 1,5 дня. При осмотре сотов отмечают признаки болезни только у личинок в возрасте 4 дней и старше. Единственный признак при этой форме болезни – это неравномерное, пестрое расположение расплода на соте.

При явной форме болезни расплод пестрый: на соте среди ячеек нормального печатного расплода встречаются беспорядочно расположенные ячейки с проваленными крышками, с отверстиями или без них. Поражается пчелиный расплод, редко – трутневый и маточный. Возраст пораженных личинок не всегда однороден, но чаще признаки болезни выявляют на 10…15-й день развития пчелы. При ярко выраженном заболевании возможна гибель личинок в раннем возрасте, в открытом расплоде. Личинка теряет нормальный тургор, сегментация тела нечеткая, окраска мутная, без блеска, а затем светло-бурая. Некоторые крышки над печатным расплодом становятся окрашенными, как бы влажными. Центр крышек опускается под массой погибшей личинки, прикрепленной к внутренней стороне крышки. В отдельных крышках имеются различной величины и формы отверстия, чаще одно, реже два и более. Недавно погибшие личинки светло-бурого цвета, по мере разложения они становятся шоколадного цвета, темно-коричневыми; тело личинки размягчается и превращается в гнилостную массу, образующую при выделении тонкие длинные нити, что является диагностическим признаком.

Погибшие  куколки также подвержены мацерации, остатки их лежат на дне ячейки, иногда с выступающим над массой язычком – остатком головного конца, реже вверх торчат членики одной или более ног. Через 20…30 дней гнилостная масса высыхает и превращается в плотную хрупкую корочку темно-коричневого или черного цвета, плотно прилипшую к нижней боковой стенке ячейки. Зашившаяся масса имеет характерный неприятный запах столярного клея.

При интенсивном  инфицировании расплода пчелы покидают пораженные соты, уходят за разделительную доску и при возможности начинают строить новые соты; в некоторых  случаях слетают. Но, как правило, без оказания помощи заболевшая семья  пчел погибает. Зараженные семьи могут  перезимовать, но в следующем сезоне плохо развиваются, подвергаются нападению  пчел сильных семей и служат источником болезни на пасеках.

 

Патологоанатомические признаки

 

Выделяют  четыре стадии изменений у личинок, зараженных американским гнильцом. В 1-й  стадии происходят изменение формы  и сглаживание сегментации, на теле обнаруживают грязно-желтые пятна, тело вытянуто в длину ячейки. На 2-й  стадии отмечают потерю формы и сегментации. Трупы личинок искривлены, коричневые, слизистой консистенции, появляется неприятный запах клея. На 3-й стадии тело превращается в кофейно-коричневого  цвета гнилостную массу, с трудом выделяемую из ячейки, а 4-я стадия характеризуется  образованием темно-коричневых струпов личинки, плотно прикрепленных к ячейке. Последние три стадии инфекционны.

При гистологическом  исследовании отмечают размножение  эноцитов, вызванное выделением патогеном токсичных веществ. В клетках эпителия средней кишки личинки появляются зернистость и вакуолизация цитоплазмы, начинаются хроматолиз и кариорексис ядер, в результате клетки погибают.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Методы борьбы с заболеванием.

При подтверждении диагноза на пасеке вводят карантин и применяют комплексный  метод лечения. Соты с большим  количеством пораженного расплода удаляют из гнезда и перетапливают  на воск. Семьи перегоняют в новый  или чистый обеззараженный улей на листы искусственной вощины или  чистые продезинфицированные соты.

Для перегона пчёл улей больной семьи  отставляют в сторону. На его место  ставят новый улей, перед ним кладут новый лист фанеры, который покрывают  газетной бумагой. Из больной семьи  вынимают одну за другой все рамки, стряхивают пчел на лист фанеры и струей дыма  из дымаря направляют пчел в  леток улья. После перегона пчел бумагу сжигают. Соты с большим количеством расплода помещают в специальные пчелиные семьи для выращивания.

 

 

 

 

 

 

 

Профилактика

 

Профилактика  болезни направлена на предупреждение заноса возбудителя, его накопления в гнездах пчел и передачи, а  также повышение резистентности семей.

Пасеку  формируют только здоровыми семьями  пчел, что должно быть подтверждено благополучием окружающих пасек  в зоне 5 км от хозяйства-поставщика; отсутствием американского гнильца в течение последних 2 лет по записи в паспорте пасек; тщательным осмотром семей пчел и контролем санитарного содержания пасеки; отрицательными результатами лабораторных исследований меда, взрослых пчел и расплода на споры Р. 1. larvae. Благополучие семей (пакетов), маток подтверждается справкой (форма вет. 1). Пчел перевозят (пересылают) в чистых, продезинфицированных ульях (пакетах), на светлых сотах, бывших в употреблении не более 2 лет, или в бессотовых пакетах. Поступивших пчел размещают на изолированных участках (в 6…7 км от пасеки), наблюдают за ними в течение 45 дней (требование МЭБ) и только после получения отрицательных результатов передают на основную пасеку.

При выезде на медосбор необходимо учитывать благополучие местности и соседних пасек по американскому гнильцу.

Предупреждение  американского гнильца требует  строгого соблюдения санитарных правил содержания пчел, территории пасеки и  подсобных помещений. Весной при ревизии семей их пересаживают в продезинфицированные улья; на каждой пасеке необходимо иметь не менее 15% запасных ульев. Очень важно ежегодно обновлять не менее 1/3 сотов гнезда. Срок эксплуатации сотов, включая соты магазинных надставок, не должен превышать 2 лет.

В активный период жизнедеятельности пчелиной семьи не допускают ее перегревания, систематически проводят осмотр расплода во всех семьях пасеки с целью определения  его состояния и своевременного выявления заболевания.

Недопустимы обезличенное осушивание пчелами сотов после откачки меда и скармливание сиропа из общей кормушки на пасеке из-за возможности переноса спор и развития пчелиного воровства.

Важным  моментам в профилактике всех заболеваний  является повышение общей резистентности пчел.

Скармливание  антибиотиков и сульфаниламидных препаратов для профилактики болезни на пасеках  нецелесообразно, так как это  делает мед непригодным к реализации из-за остатков в нем препаратов.

Ульи, соты, инвентарь подвергают профилактической дезинфекции, проводят очистку и  побелку складских помещений, еженедельно  очищают предлетковые площадки.