Вірусний гепатит собак

1. Визначення хвороби

     Інфекційний гепатит м'ясоїдних (лат. - Hepatitis infectiosa carnivorum; англ. - Infectious canine hepatitis; гепатит м'ясоїдних, хвороба Pyбарта) - гостро протікаюча контагіозна хвороба, що характеризується лихоманкою, катаральним запаленням слизової оболонки дихального і травного тракту, ураженням очей, печінки і центральної нервової системи.

      Історична довідка, поширення, ступінь небезпеки і збиток.

      Вперше вірус гепатиту виділив Грін (1928) в США у сріблясто-чорних лисиць. У СРСР це захворювання у лисиць і песців описали А.П. Кіру-Муратов (1932), І.Г. Лебенберг (1937). У собак інфекційний гепатит вивчав С. Рубарта (1947). Хвороба поширена в багатьох країнах - США, Японії, Швеції, Данії, Англії, Туреччини, Росії.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Збудник хвороби

     Збудник гепатиту м'ясоїдних - ДНК-вірус з роду Mastadenovirus сімейства Adenoviridae. За вірулентності штами трохи різняться, але в антигенному відношенні всі вони однорідні. Залежно від вираженості тропізму до тканини печінки або мозку штами вірусу поділяють на нейро-і гепатотропні. Вірус культивується в культурах клітин епітелію, викликаючи в них виражене ЦПД з утворенням внутрішньоядерних тілець-включеній. Віріони збудника гепатиту м'ясоїдних розташовуються в ядрах клітин. Структура їх включає преципітує, гемоглютинуючим і комплементозвязуючим антигени. У всіх штамів є однаковий груповий і специфічні а комплементозвязуючі антигени. Вірус стійкий до різних фізичних факторів.

     При заморожуванні, висушуванні і в 50% розчині гліцерину при кімнатній температурі вірус залишається вірулентним протягом декількох років, в природі він може зберігатися більше 2 років. При температурі 4° С вірус зберігає активність більше 9 міс, при 37° С - до 39 днів, 50° С – 150 Міні, 60° С – 3 - 5 хв, 100° С - 1 хв. Збудник стійкий до ефіру, хлороформу і метанолу та нестійкий до формаліну, лізолу, фенолу, свіжогашеного вапна, які інактивують його протягом 30 хв. В природних умовах до інфекційного гепатиту сприйнятливі собаки всіх віків і порід, але більш чутливий молодняк у віці 1,5 – 6міс. Тварини більші З років хворіюють рідко. Хворіють також песці, лисиці, вовки і шакали. Миші, мавпи і людина можуть бути прихованими носіями вірусу інфекційного гепатиту м'ясоїдних.

 

 

3. Епізоотологічні дані

     У природних умовах до інфекційного гепатиту сприйнятливі собаки всіх віків і порід. Хвороба реєструється також серед лисиць, песців, єнотів, вовків і тхорів. Основне джерело інфекції - хворі собаки, які виділяють вірус з сечею, носовим слизом, кон'юнктивальний секретом і калом. Характерно тривалий вірусоносійство - протягом ряду років. Це підтверджується неодноразовими випадками занесення інфекції в благополучні господарства при закупівлі племінних самців і самок, до числа яких потрапили хронічно хворі. Природне зараження відбувається через слизові оболонки носової і ротової порожнин, шлунково-кишковий тракт і статеві органи. Установлені випадки розповсюдження хвороби при недотриманні правил асептики і антисептики під час хірургічних операцій, щеплень, взяття крові.

     Ензоотіі інфекційного гепатиту носить сезонний характер, але частіше спостерігається навесні і влітку при появі молодняку. Спорадично ж захворювання зустрічається в будь-який час року, що пов'язано в основному із загостренням латентного або хронічного перебігу хвороби під впливом будь-яких несприятливих умов. При виникненні хвороби в собаководческіх розплідниках протягом ензоотіі інфекційного гепатиту спостерігається певна послідовність. У початковому періоді розвитку ензоотіі відзначають одиничні випадки гостропротікаючої хвороби. Надалі за відсутності необхідних ветеринарно-санітарних заходів ензоотія поширюється, захоплюючи в перші 2 - 3 тижнів, значна кількість собак і поступово затухаючи до кінця 2 - 3-го місяця. Така динаміка не суворо постійна і залежить від епізоотичної обстановки, ступеня первинного охоплення поголів'я і тривалості перебігу ензоотіі. Захворювання і летальність коливаються також в значних межах і залежать від стану опірності організму та умов утримання тварин. За даними іноземної літератури, самки-вірусоносії протягом ряду років можуть заражати своїх цуценят, а також самців-виробників за умови тісного контакту з ними, особливо під час злучки. У перехворілих собак незалежно від тяжкості перенесеного інфекційного процесу настає тривалий, практично довічний імунітет. Антитіла з'являються на 15-21- й день і. досягають максимуму на 30-й день.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4. Симптоми хвороби

     При природному зараженні інкубаційний період триває від 3 до 9 днів, іноді довше; при експериментальному зараженні – 6 - 8 днів. Хвороба звичайно починається з поступово наростаючою млявостю: собаки стають малорухомими, більше лежать, насилу встають, при русі хода хитка, знижується апетит, а потім вони відмовляються від корму. З'являються характерні ознаки гепатиту: блювота з домішкою жовчі, односторонні або двосторонні кератити і тонзілліт. А надалі тварини швидко худнуть, у них розвивається анемія слизових оболонок очей і ротової порожнини, у деяких - жовтушність склер. Сеча приймає темно-бурого забарвлення, що також часто є характерною ознакою гепатиту. Тварини болісно реагують на пальпацію в ділянці печінки, стають ніби обережними у рухах. При цьому часто приймають позу сидячої собаки, широко розставивши передні лапи.

     Особливої уваги при гепатиті заслуговує температурна реакція. У перші дні хвороби температура звичайно нормальна, але на 4 – 6 - й день вона швидко підвищується до 41- 41,7 ° С і тримається на такому рівні майже до загибелі тварини. У період лихоманки носове дзеркало у собак сухе і вони відчувають підвищену спрагу. Відзначається розлад серцево - судинної системи: число серцевих ударів зростає до 90 - 110 в хвилину і вище, серцевий поштовх посилений, а пульс при тяжкому перебігу хвороби ослаблений, іноді аритмічний. Дихання прискорене до 40-50 на хвилину. При прослуховуванні легень чути хрипи.

     Різко виражена лейкопенія (3-2 тис. лейкоцитів), що змінюються в період пониження температури значним лейкоцитозом (до 30-35 тис). Лейкоцитарна формула майже завжди зазнає закономірні зміни. У перші дні спостерігається відносне збільшення відсотка нейтрофілів зі зникненням еозинофілів і зрушенням вліво до юних, зниження відсотка лімфоцитів до 7-15, моноцитоз. Відзначається токсична зернистість нейтрофілів, у багатьох тварин у крові з'являються плазматичні клітини. У гострий період хвороби значно прискорюється ШОЕ - до 20 - 30 мм, рідше до 60 і досягає 70 - 80 мм протягом 24 ч.

     Подібні зміни картини крові відображають стан організму тварини в ході його боротьби з інфекцією. Зменшення кількості лейкоцитів і еозинофілів, а також різко виражений зсув вліво - несприятливі показники, що свідчать про злоякісний перебіг хвороби. І навпаки, різке збільшення числа лейкоцитів і поява нормального числа еозинофілів свідчать про одужання тварини. Тривалість хвороби різна - від декількох днів до 2 - 3 тижнів. Гинуть cобаки, перебуваючи звичайно в глибокому коматозному стані і абсолютно не реагуючи на зовнішні подразнення. Іноді за кілька годин перед смертю у деяких тварин спостерігаються посмикування окремих груп м'язів, судоми і мимовільні рухи кінцівок. При хронічному перебігу гепатиту у собак симптоми хвороби виражені нерізко і носять невизначений характер. Іноді вони проявляються зниженням або тимчасовою втратою апетиту, розладами діяльності шлунково-кишкового тракту (проноси, що змінюються запорами) і прогресуючим схудненням. Під час хронічного перебігу хворобі властиві рідкісні короткочасні підйоми температури тіла. Напади можуть бути різні як за інтенсивністю, так і за тривалістю загострення. Іноді спостерігається важкий перебіг хвороби. Ремісії між нападами лихоманки не мають особливої закономірності, температура підвищується з інтервалом у кілька днів, тижнів і навіть на місяць. Найчастіше напади лихоманки супроводжуються відхиленнями з боку серцево-судинної системи, різного ступеня анемій слизових оболонок, явище гастроентериту. Хронічно хворі самки найчастіше абортують або приносять нежиттєздатних цуценят. У хроніків відзначають довго не проходять кератити одного або обох очей.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5. Патологоанатомічні зміни

     В органах при інфекційному гепатиті собак зміни надзвичайно різноманітні і залежать від тривалості і тяжкості хворобливого процесу. При гострому перебігу хвороби трупи собак зазвичай мають задовільну вгодованість.  Знаходять поширений (іноді геморагічний) набряк підшкірної клітковини, зобної і підшлункової залоз. Характерним є набряк стінки жовчного міхура і його ложа. Більш ніж в 40% випадків в черевній порожнині зустрічається прозорий жовтуватий або кров'яний ексудат, що має вигляд чистої крові. На вісцеральної очеревині кишечнику і на печінці можуть бути фібринозно - геморагічні накладення. Печінка збільшена, з виразним часточковим малюнком; в одних випадках темно-червона, повнокровна, в інших - світлого жовтувато - коричневого або яскравого охряно - жовтого кольору, іноді з дрібним нерівномірним крапом під капсулою і на поверхні розрізу. Більш ніж в 90% випадків впадає в очі значний драглистий набряк стінки жовчного міхура. Селезінка приблизно в 50% випадків збільшена і повнокровна. У шлунку зазвичай буває тільки слиз, нерідко темно - коричневого або майже чорного кольору. На слизовій оболонці шлунка можливі геморагії, іноді ерозії. У кишечнику частіше знаходять незначні зміни, але іноді слизова оболонка тонкого і товстого відділів потовщена, вкрита великою кількістю слизу і множинними крововиливами. Постійна ознака інфекційного гепатиту - драглистий набряк і повнокров'я вилочкової залози, в більшості випадків з множинними крапковими крововиливами в ній. Навколо вилочкової залози прилеглі тканини сильно набряклі, набряк може поширюватися на шию, нижню поверхню грудей і середостіння. Селезінка набрякла, вишнево-червоного кольору, кровенаполнена, пульпа на розрізі соковита, зішкріб рясний. Іноді вона буває не збільшена, червонувато - сірого або сірувато - малинового кольору. Нирки здебільшого збільшені, капсула напружена. але знімається легко. Паренхіма пронизана точковими і полосчатим крововиливами. На розрізі малюнок згладжений, межа між кірковим і мозковим шарами згладжена. Часто нирки бувають застійно гіперемійовані, а мозковий шар їх темно-червоний. Підшлункова залоза збільшена, кровенаповнена, сірувато-жовтого кольору. На поверхні точкові крововиливи, часто проникають в глиб тканини. Ступінь зміни інших органів залежить від тривалості хвороби. Так, в серцево-судинній системі спостерігають серозний перикардит, в легенях - ущільнення і окремі ділянки ателектазу, в головному мозку в окремих випадках може бути помітна гіперемія, зрідка точкові крово-виливи в області підкіркових вузлів і нижчих відділів стовбура.

     При затяжних, хронічних течіях інфекційного гепатиту відзначають явища анемії і сильне виснаження тварин. Дегенеративні зміни паренхіматозних органів виражені в самій різного ступеня у вигляді зернистого білкового та жирового переродження. В окремих випадках вони особливо різко виражені в серці, печінці, нирках і іноді в скелетних м'язах. Печінка збільшена, ущільнена зі своєрідним малюнком мускатного, жирова дистрофія виражена сильно. Особливий інтерес при вірусному гепатиті собак представляють гістологічні зміни в печінці. Печінка при гострому перебігу хвороби кровенаполнена, великі судини її розширені. У просвітах кровоносних судин відзначається підвищене скупчення еритроцитів, серед них чимало ядерних елементів крові, а також клітин проліферуючих ендотелію, іноді згорнувся фібрин. Еритроцити і серозний випіт виявляються також в просвітах Діссе, в результаті нього виникає різке обрис часточкової малюнка. Відзначають виражений периваскулярний набряк і геморагічну інфільтрацію. Структура печінкових балок в зоні ураження порушена. Більшість клітин збільшено, цитоплазма їх розріджена, містить. Безліч різних за величиною крапель жиру. Окремі клітини зменшені, з ущільненої, різко ацидофільної цитоплазмою, пікнотіческім ядром. Відзначають також дифузні дистрофічні зміни печінкових клітин, аж до їх некрозу, головним чином у центральних та середніх зонах часточок. При тривалому перебігу хвороби патологічні зміни зводяться до сильної або помірною дистрофії. При важких змінах тканину печінки недокрівна, поряд з вогнищевими некрозами бувають великі некрози з загибеллю значних ділянок паренхіми. Характер дегенеративних змін складається з паренхіматозного, зернистість - жирового переродження, нерідко з явищами клітинного розпаду.

     Поширеність та інтенсивність змін бувають неоднакові не тільки у різних хворих собак, але і у однієї і тієї ж тварини в різних ділянках органу. У селезінці і лімфатичних вузлах спостерігають повнокров'я і ретикулярну гіперплазію пульпи. Часто відзначають некробіотичні зміни в центрі фолікулів. У нирках можна бачити повнокров'я клубочків, набухання клітин ендотелію капілярів клубочків. У ниркових канальцях помітні дистрофічні зміни ендотелію, який у більшості випадків набряклий, межі між клітинами згладжені. У шлунку і тонкому відділі кишечника є крововиливи і вогнищеві некрози слизової оболонки. У головному мозку відзначають ін'єкцію судин м'якої мозкової оболонки, в деяких випадках - діапедезні крововиливи. Іноді можна спостерігати круглоклітинна інфільтрацію м'якої мозкової оболонки, в нервових клітинах - важкі дистрофічні процеси, часто закінчуються лізисом нейронів. При гістологічному дослідженні для інфекційного гепатиту характерні внутрішньоядерні включення типу Рубарта. Найчастіше вони зустрічаються в печінкових клітинах Купфера. в ендотелії судин, в ретикулярних клітинах всіх органів, особливо селезінки, нирок і лімфатичних вузлів. У більшості випадків внутрішньоядерні тільця можуть бути еозинофільними або пофарбованими в нейтральний колір. Форма їх кругла або овальна. Структура гомогенна. Між включенням і ядерної оболонкою, як правило, мається оптично порожня зона, в якій у окремих клітин добре видно тонкі хроматіновие тяжі. Для гістологічного дослідження при розтині тварин окремо з різних часток печінки беруть кілька шматочків товщиною не більше 1 см, які фіксують в 10%-ном нейтральному формаліні не менше 2-3 днів. Після фіксації зі шматочків вирізують пластинки товщиною 4-5 мм, ретельно відмивають їх проточною водою і на заморожували мікротому роблять гістологічні зрізи товщиною 6-7 мкм. Фарбують їх гематоксілінеозіном за загальноприйнятою методикою. Сформовані тільця Рубарта розташовуються найчастіше в центрі ядер печінкових клітин і мають розмір від 0,5 до 0,75 мкм.     Спочатку вони оксифільні, пухкі, з розмитими нечіткими краями, а надалі базофільні, з чітко окресленими краями.

 

 

 

 

6. Діагностика вірусного гепатиту

     Діагноз на інфекційний гепатит ставлять на підставі аналізу епізоотологічних даних, клінічних ознак, патологоанатомічних змін і лабораторних досліджень на наявність тілець Рубарта в мазках-відбитках або гістологічних зрізах печінки.

     У мазках - відбитках і гістологічних зрізах виявляють внутрішньоядерні включення - тільця Рубарта, які представляють собою гомогенну масу круглої або овальної форми, розташовану в центрі ядра, із зоною просвітління навколо них. Хроматин і ядерця розташовуються по периферії ядра у вигляді точкових скупчень, пофарбованих у темно-синій колір. Внутрішньоядерні включення фарбуються в синювато-червонуватий або рожевий колір, чітко контрастуючи на загальному тілі препарату. В даний час для лабораторної діагностики гепатиту успішно апробовані також різні серологічні та біологічні методи. Серед них широке застосування знайшла РДП. Дану реакцію застосовують для ретроспективної діагностики вірусного гепатиту, для виявлення вірусу зі свідомо відомими антисироватками, а також для диференціальної діагностики. Кроме РДП при лабораторній діагностиці інфекційного гепатиту собак використовують РСК, РДА, РЗГА, РІФ, РН і біопробу шляхом зараження цуценят в передню камеру ока і виділення вірусу в культурі клітин.

     Інфекційний гепатит собак необхідно диференціювати від чуми, лептоспірозу, сальмонельозу, парвовірусного ентериту собак. Вирішальне значення при цьому надається лабораторним методам дослідження. Імунітет, специфічна профілактика.

     У перехворілих гепатитом тварин незалежно від тяжкості перенесеного інфекційного процесу формується тривалий, практично довічний імунітет. Антитіла проти вірусу з'являються на 15 - 21-й день після зараження і досягають максимуму на 30-й день.

     Для специфічної профілактики застосовують моновалентние та асоційовані інактивовані вакцини і гіперімунні сироватки. Вакцинація створює імунітет тривалістю до 1 року.

      Високої лікувальною ефективністю на початку хвороби володіє полівалентна сироватка проти чуми м'ясоїдних, інфекційного гепатиту і парвовірусного ентериту собак. З симптоматичних засобів терапії найбільше застосування отримали вітаміни групи В, аскорбінова кислота, полівітаміни, гепатопротектори - сирепар, есенціале, карсил та ін. При секундарних інфекціях хворим призначають антибактеріальні препарати.

     Інфекційний гепатит діагностують на підставі епізоотологічних, клінічних та патологоанатомічних даних, а також вірусологічних досліджень і біопроб. В якості досліджуваного матеріалу у хворих собак в період гострого перебігу хвороби беруть сироватку крові, а у полеглих тварин - асцитної рідина або печінку. Суспензію з печінки готують загальноприйнятим методом і заражають чутливих тварин або культуру тканини, приготовану з нирок цуценят собак. Експериментально гепатит можна відтворити у собак, лисиць і песців, використавши для цієї мети тварин 4-6-місячного віку, попередньо перевірених на інфекційний гепатит. Хвороба відтворюється закономірно і в типовій формі при зараженні в передню камеру очі або у вену. У заражених тварин симптоми хвороби проявляються на 6 - 7-й день. У зараженій культурі тканини нирок собак вірус розмножується з характерними цитопатичної змінами: появою окремих округлих рефрактільних клітин, які поступово відриваються від скла. У міру розвитку інфекції число клітин, які зазнали дегенерації, збільшується і утворюються великі порожнечі в монослої. По краях збереглися острівців уражені клітини концентруються, утворюючи великі конгломерати, що нагадують грона винограду.  Специфічність цитопатичних змін підтверджується в реакції нейтралізації.