Презентация
«Конфокальный
микроскоп»
- Конфокальный
микроскоп — оптический микроскоп,
обладающий значительным контрастом по сравнению
с обычным микроскопом, что достигается
использованием апертуры, размещённой
в плоскости изображения и ограничивающей
поток фонового рассеянного света.
История
- В
1950-х годах биологам понадобилось увеличить
контраст наблюдения меченых флюорохромами объектов в толстых срезах тканей. Для разрешения
этой проблемы Марвин Минский, профессор Массачусетского технологического института в США, предложил использовать для флуоресцентных микроскопов конфокальную схему. В 1961 г. Минский получил на эту схему патент.
Принцип
работы
Рассеянный
свет, идущий из глубины образца (пунктирные
линии синего цвета), отрезаются апертурами,
что обеспечивает высокий контраст изображения..
- Конфокальный
микроскоп, имеющий высокий контраст,
даёт две неоценимые возможности: он позволяет
исследовать ткани на клеточном уровне
в состоянии физиологической жизнедеятельности,
а также оценивать результаты исследования
(то есть клеточной активности) в четырёх
измерениях — высота, ширина, глубина
и время.
Пример изображения
в конфокальном микроскопе: β-тубулин в инфузории Tetrahymena
- Конфокальная
микроскопия — один из методов оптической
микроскопии, обладающий значительным
контрастом по сравнению с микроскопами
классической схемы за счет использования
диафрагмы, отсекающей поток фонового рассеяного света. В конфокальном микроскопе в каждый момент времени регистрируется изображение одной точки объекта, а полноценное изображение строится путем сканирования.
- Наиболее
часто встречающейся задачей для конфокальной
микроскопии, благодаря ее высокому разрешению
и контрасту, является изучение структуры
клеток и их органелл, например, цитоскелета, ЭПР, лизосом, митохондрий, ядра, хромосом и даже генов. Исследуется также локализация в клетке двух и более веществ.
Еще одна задача – исследование динамических
процессов, происходящих в живых клетках.
Например, клеточного транспорта биологически-активных
соединений, изменений концентрации и
распределения ионов кальция.
Спасибо
за внимание!