Химические методы оказались
самыми надежными и эффективными, они
дают возможность выполнить анализ быстро
и с высокой достоверностью. В случае сомнения
в результатах анализа последнее слово
остается за химическими методами.
Количественные методы химического
анализа подразделяют на гравиметрический,
титриметрический, газометрический анализ
и количественный элементный анализ.
1.3.4. Биологические
методы.
Применяют биологические методы,
когда с помощью физических, химических
или физико-химических методов не удается
сделать заключение о чистоте или токсичности
лекарственного препарата или когда способ
получения препарата не гарантирует постоянства
активности (например, антибиотики).
Биологические методы контроля
качества ЛС весьма разнообразны - среди
них
- Испытания на токсичность осуществляют на животных, отдельных
изолированных органах, группах клеток,
на определенных штаммах микроорганизмов.
- Испытания на стерильность.
Целью этого испытания является доказательство
отсутствия в лекарственном средстве
жизнеспособных микроорганизмов любого
вида с максимально возможной достоверностью.
Результаты испытания на стерильность
— один из важнейших показателей безопасности
лекарственных средств. Этому испытанию
подвергаются все лекарства для парентерального
введения, глазные капли и мази, лекарства,
наносимые на открытую рану, и др. Эффективность
данного вида контроля определяют такие
факторы, как отбор образца для анализа,
техника посева лекарственного средства,
состав питательных сред, время инкубации
посевов, интерпретация и учет
результатов испытания.
- Испытания на микробиологическую
чистоту. Необходимость проведения этого
испытания вызвана тем, что лекарственные
средства, в том числе выпускаемые в виде
таких лекарственных форм, как таблетки,
капсулы, гранулы, растворы, сиропы, мази,
не стерилизуются в процессе производства.
Поэтому они могут быть загрязнены микроорганизмами.
Испытание включает количественное определение
жизнеспособных бактерий и грибов и выявление
некоторых видов микроорганизмов, представителей
кишечной флоры и стафилококка, содержание
которых недопустимо в нестерильных лекарственных
средствах.
Методики, используемые в фармацевтическом
анализе, должны быть чувствительными,
специфическими, избирательными, быстрыми
и пригодными для экспресс-анализа в условиях
аптеки.
2. ЛС, производные
ароматических аминов.
В этой группе рассматриваются
вещества, которые делятся на следующие
группы:
- Производные анилина (Парацетамол)
- Производные n-аминобензолсульфамида:
- Хлорпроизводные (Хлорамин Б)
- Производные амида сульфаниловой кислоты (Стрептоцид)
ЛС, производные
аминокислот ароматического ряда.
Сложные
эфиры п-аминобензойной кислоты (Тетракаина гидрохлорид)
Важнейшей функциональной
группой в этих препаратах
является аминогруппа, как свободная,
так и с атомами водорода, замещенными
различными функциональными группами
(алкилами, группами ОН и т. д.).
2.1. Производные анилина.
2.1.1. Парацетамол
(Paracetamolum)
n-ацетаминофенол,
N – (4-гидроксифенил) ацетанилид
Синтез парацетамола выполняют
ацетилированием n-аминофенола:
Известен также способ синтеза
парацетамола из фенола:
Применение.
Основными фармакологическими
эффектами препарата являются болеутоляющее
и жаропонижающее действия. При приеме
внутрь в обычных терапевтических дозах
(500–600 мг) он быстро и практически полностью
всасывается из пищеварительного тракта
Применяют в качестве болеутоляющего
средства при головной боли, невралгиях,
миалгии, как жаропонижающее – при простудных
заболеваниях.
Хранение.
Парацетамол хранят по списку
Б в хорошо укупоренной таре, в сухом месте.
Предохраняют от действия света, чтобы
не допустить гидролиза и окисления.
Rp.: Tab. Paracetamoli 0,2
D.t.d. №10.
Signa: По 1 таблетке
четыре раза в день
Описание.
Таблетки белого или белого
с кремовым оттенком без запаха.. Растворимость.
Легко растворимы в воде и спирте.
Температура плавления
168–172 0С
- Физико-химический
контроль.
В лекарственных формах парацетамол
определяют спектрофотометрическим методом
в максимуме поглощения (при 257 нм) с использованием
в качестве растворителя 0,1 М раствора
гидроксида натрия. Разработан способ
спектрофотометрического определения
парацетамола в таблетках, основанный
на использовании в качестве стандартного
образца дихромата калия (при длине волны
243 нм). Положительные результаты при анализе
парацетамола в лекарственных формах
были достигнуты методом производной
спектрофотометрии. Более селективным
при определении парацетамола в присутствии
продуктов разложения оказался метод
ГЖХ.
Фотоколориметрический метод
определения парацетамола основан на
образовании молибденовой сини при взаимодействии
с молибдатом аммония в сильнокислой среде.
Светопоглощение измеряют при длине волны
670 нм.
Испытание на подлинность.
Реакция окисления
с дихроматом калия K2Cr2O7
При кипячении с разведенной
кислотой хлороводородной парацетамол
подвергается гидролитическому расщеплению
с образованием уксусной кислоты и п-аминофенола.
Последний окисляется калия дихроматом
до хинонимина, который далее вступает
во взаимодействие с непрореагировавшим
п-аминофенолом. В результате реакции
образуется индофеноловый краситель фиолетового
цвета, неизменяющийся при стоянии.
2. Реакция гидролитического
расщепления.
При кислотном гидролизе парацетамола
образуется CH3COOH, которая
может быть обнаружена по запаху (п-аминофенол
можно обнаружить по реакции образования
по реакции азокрасителя)
Методика: 0,1 г препарата осторожно кипятят
с 2 мл разведенной HCI в течение 2 мин, ощущается
запах уксусной кислоты.
3. Реакция с
реактивом Марки
4. Реакция образования
азокрасителя.
Парацетамол также образует
красного цвета азосоединение с диазореактивом
за счет наличия в молекуле фенольного
гидроксила:
Приготовление диазореактива: к 50 мл 0,5% раствора кислоты
сульфаниловой в 1.5% растворе HCI добавляют
1мл0,5% свежеприготовленного раствора
NaNO2 (натрия нитрата).
Количественное определение.
1. Нитритометрия.
Метод основан на свойстве препарата
диазотироваться нитритом натрия в соляно
– кислой среде. Последняя нужна для образования
диазотирующей частицы. Титрование проводят
в присутствии катализатора KBr.
В присутствии калия бромида
образуется диазотирующая частица – нитрозил
бромид Br-N=O, скорость образования которой
в 300 раз выше, чем нитрозилхлорида, а, следовательно,
и скорость реакции диазотирования возрастает.
Титруют медленно, т. к. скорость реакции
диазотирования мала. Определение проводят
на холоду, поскольку соль диазония при
нагревании в водных растворах неустойчива
и легко разлагается с выделением азота:
При определении ацильных производных
ароматических аминов предварительно
проводят кислотный гидролиз:
Методика: около 0,25г препарата (точная
навеска) помещают в коническую колбу
вместимостью 100 мл, приливают 10 мл разведенной
кислоты хлористоводородной и кипятят
с обратным холодильником в теч 1 ч. Затем
холодильник промывают 30 мл воды, содержимое
колбы количественно переносят в стакан
для диазотирования, промывают колбу 30
мл воды, добавляют 1г KBr. Далее титруют
нитритом натрия. Конечную точку титрования
определяют двумя способами:
электрохимическим (потенционометрическое
титрование)
визуальным (с помощью внутренних
и внешгих индикаторов).
При потенциометрическои титровании
в качестве индикаторного электрода применяют
платиновый электрод; электродом сравнения
служит каламельный электрод.
Внутренние индикаторы указываются
конкретно в частных статьях ГФ. В качестве
внутренних индикаторов используют тропеолин
00 и 2 капли раствора метиленового синего,
нейтральный красный (2 кап 0,5% раствора
в начале и в конце титрования) и др. Индикатор
тропеолин 00, который в кислой среде окрашен
в красно – фиолетовый цвет, от избытка
HNO2 становится
бесцветным или слабо-желтым. Титрование
со смесью индикаторов (тропеолин 00 +метиленовый
синий) ведут до перехода окраски от красно
– фиолетовой до голубой, с нейтральным
красным – от малиновой до синей. Выдержку
в конце тирования с нейтральным красным
увеличивают до 2-х минут.
Иодкрахмальная бумага как
внешний индикатор может быть применена
во всех случаях нитритометрического
определения фармакопейных препаратов.
Индикатор - иодкрахмальная бумага – это
пропитанная водными растворами крахмала
и калия иодида фильтровальная бумага.
Титруемую жидкость стеклянной палочкой
наносят на полоску иодкрахмальной бумаги.
Титрование с иодкрахмальной
бумагой ведут до тех пор, пока капля титруемого
раствора, взятая через 1 мин после прибавления
раствора натрия нитрита, не будет немедленно
вызывать синее окрашивание бумаги.
NaNO2 + HCl
NaCl + HNO2
KI + HCl KCl + HI
2HNO2 + 2HI
I2 + 2NO + 2H2O
Параллельно проводят контрольный
опыт.
1 мл 0,1 мол раствора нитрита
натрия соответствует 0, 01512г парацетамола,
содержание которого 0,19 – 0,21г, считая
на средний вес одной таблетки.
Испытание на чистоту.
Парацетамол подвергают контролю
на содержание примесей промежуточных
продуктов синтеза. Обнаруживают допустимое
содержание примеси п-хлорацетанилида
методом ТСХ на пластинках Силуфол УФ-254
или Сорбфил по отношению к СОВС п-хлорацетанилида
в смеси растворителей хлороформ-ацетон-толуол
(65:25:10). Оценку пятен на хроматограммах
выполняют в УФ-свете при длине волны 254
нм. Устанавливают также содержание примеси
свободного п-аминофенола
(не более 0,005%). Для выполнения испытания
предварительно готовят для контроля
парацетамол, не содержащий п-аминофенола
(перекристаллизацией из воды). Затем растворяют
испытуемый и контрольный парацетамол
в смеси метанола и воды (1:1). В качестве
реактива используют свежеприготовленный
раствор нитропруссида натрия. Окраска
раствора испытуемого парацетамола не
должна быть интенсивнее, чем у контрольного
раствора.
2.2. ЛС, производные
n-аминобензолсульфамида (амида сульфаниловой
кислоты):
К Лекарственным средствам,
производным n-аминобензолсульфамида
относятся препараты, обладающие
различным фармакологическим действием:
антибактериальным (сульфаниламидные
препараты), диуретическим, антисептическим
(хлоропроизводные).
2.2.1. Хлорпроизводные
амида бензолсульфокислоты.
К этой группе относятся моно-
и дихлорзамещенные амидов сульфокислот:
хлорамин Б и дихлорамин Б. Они обладают
способностью легко отщеплять атомы «активного
хлора», который проявляет окислительные
свойства.
Буквенные обозначения указывают
на то, что для их получения используют
бензол. Хлорамин Б и дихлорамин Б различаются
по содержанию активного хлора.
Медицинское применение имеет хлорамин Б (более
устойчив при хранении).
Хлорамин Б (Chloraminum
B)
N-хлорбензолсульфамид-натрий,
тригидрат
Для синтеза хлораминов используют
общий принцип, основанный на получении
амида бензолсульфокислоты, который затем
хлорируют с помощью гипохлорита натрия.
Исходным продуктом для получения хлорамина
Б служит бензол:
Применение.
Хлорамин Б применяют в качестве
активных антисептических средств. Хлорамин
Б назначают для лечения инфицированных
ран, а также используют для обезвреживания
иприта и других токсичных органических
веществ, попавших на кожу (1,5–2%-ные растворы),
для дезинфекции рук (0,25–0,5%-ные), инструментария,
предметов ухода за инфекционными больными
(1–3%-ные).
Хранение.
Хлорамин Б хранят в хорошо
укупоренной таре, предохраняющей от действия
света, в сухом прохладном месте. Соблюдение
указанных условий позволяет предотвратить
их разложение, которое происходит под
действием влаги и углекислого газа, содержащихся
в воздухе и приводит к снижению содержания
активного хлора.
Rp.: Sol. Chloramini В 0,5% -
200ml
Da .Signa: Для обработки
неметаллического инструментария.
Описание. Хлорамин Б - белые или слегка
желтоватые кристаллы или кристаллический
порошок со слабым запахом хлора.
Расчтворимость. Растворим в воде, очень мало
растворим в эфире и хлороформе.
Химические свойства хлорамина
Б обусловлены наличием активного хлора
в молекулах.
Испытание на подлинность.
- Гидролиз. При растворении в воде хлорамин
Б гидролизуется с образованием гипохлорита
натрия. Затем происходит гидролиз гипохлорита
натрия и разложение хлорноватистой кислоты
(кислородный распад):